添加QQ号
3004901493
产品型号:
更新时间:2025-08-12
厂商性质:经销商
访问量:239
021-39596320
相关文章
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品属性:
产品名称 | 大鼠前列腺上皮细胞 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X0925 |
名称 大鼠前列腺上皮细胞
2.组织来源:前列腺
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
大鼠前列腺上皮细胞分离自前列腺组织;前列腺(Prostate)是雄性*的性腺器官;前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分;作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。前列腺上皮细胞与前列腺的功能关系密切,上皮细胞的损伤是前列腺炎的主要病症,重度的前列腺炎患者的前列腺液内可检测到脱落的上皮细胞,这是上皮细胞损伤的标志。炎症发生时,与炎症相关的一些炎症因子可能发生变化。因此,体外培养前列腺上皮细胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基础。前列腺主要特征如下:①前列腺结构和功能活动均受雄性激素的调控;②基底细胞主要表达高分子量细胞角蛋白(CK-5、CK-14),基底上皮细胞可分化成管腔上皮细胞;③前列腺上皮细胞的培养为研究前列腺的许多重要特性以及化学和激素性致癌作用提供了机会。
5.方法简介:
公司实验室分离的大鼠前列腺上皮细胞采用先中性蛋白酶消化、后胶原酶-联合消化并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
6.质量检测:
公司实验室分离的大鼠前列腺上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
抗利尿激素/血管升压素/加压素/血管加压素抗体
ATP结合盒蛋白家族GCN20F家族1抗体
激素受体相关蛋白16抗体
β淀粉样肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族13抗体
大鼠钠/葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)elisa检测试剂盒
大鼠钠/钾离子转运ATP酶β4肽(ATP1β4)elisa检测试剂盒
大鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)elisa检测试剂盒
大鼠钠/钾离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1)elisa检测试剂盒
大鼠钠/钾离子转运ATP酶α1肽(ATP1α1)elisa检测试剂盒
大鼠前列腺上皮细胞人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-(AcSDKP)elisa分析检测试剂盒
人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-(AcSDKP)elisa检测试剂盒免费代测
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)elisa分析检测试剂盒
人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)elisa检测试剂盒
人OX40配体(OX40L)elisa检测试剂盒
实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。