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兔外周血巨噬细胞
产品简介:

兔外周血巨噬细胞公司其它各种产品甘肽S转移酶α1抗体 0酸化Ephrin B抗体
甘肽S转移酶κ抗体 0酸化eIF4E结合蛋白抗体
甘肽S转移酶θ抗体 0酸化EGF应答因子1抗体
甘肽S转移酶θ2抗体 0酸化D激酶衰减蛋白2抗体
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3受体抗体 0酸化D激酶衰减蛋白1抗体

产品型号:

更新时间:2022-04-11

厂商性质:经销商

访问量:265

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产品介绍

产品属性:

产品名称

兔外周血巨噬细胞

规格

5×10Cells/T25培养瓶

货号

GOY-01X0832

名称    兔外周血巨噬细胞
2.组织来源:外周血

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

兔外周血巨噬细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。

5.方法简介:

公司实验室分离的兔外周血巨噬细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法、差速贴壁、细胞因子诱导法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的兔外周血巨噬细胞CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基 FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 巨噬细胞样

传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液12mM

培养条件 气相:空气,95%CO25%

图片13.jpg

冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按 12 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1.
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm
离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3.
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1
、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
2
、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3
、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5
、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1
、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5
PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6
、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
荚膜红细菌   刺孢吸水链霉菌昆明变种

土壤伯克氏菌   棉铃虫拟青霉

假单胞杆菌   无花果曲霉

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae   米曲霉

长根菇(长根奥德磨)   阿达青霉
大鼠腱蛋白(CHRD)elisa检测试剂盒

大鼠碱性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)elisa检测试剂盒

大鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)elisa检测试剂盒

大鼠间隙连接蛋白43(CX43)elisa检测试剂盒

大鼠间羟肾上腺素(MN)elisa检测试剂盒
兔外周血巨噬细胞25羟基D3(25 HVD3)elisa分析检测试剂盒

25羟基D3(25 HVD3)elisa检测试剂盒

26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)elisa分析检测试剂盒

26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)elisa检测试剂盒

28S抗核糖体抗体(28S rRNP)elisa分析检测试剂盒


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