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大鼠胰腺星状细胞
产品简介:

大鼠胰腺星状细胞公司其它各种产品0酸化成纤维细胞生长因子受体3抗体 0脂蛋白受体Dab1抗体
叉头相关结构域包含蛋白1抗体 0酸酯酶-2Ac抗体
串珠状纤维结构蛋白1抗体 0酸脂0酸水解酶2抗体
高嗜酸性粒细胞综合症相关蛋白FIP1L1抗体 0酸脂0酸水解酶1抗体
锌指蛋白798抗体 0酸乙转移酶A抗体

产品型号:

更新时间:2025-07-17

厂商性质:经销商

访问量:216

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021-39596320

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产品介绍

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按 12 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1.
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm
离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3.
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

图片2.jpg

产品属性:

产品名称

大鼠胰腺星状细胞

规格

5×10Cells/T25培养瓶

货号

GOY-01X0751

名称    大鼠胰腺星状细胞
2.组织来源:胰腺组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠胰腺星状细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、原、脂肪酶、等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星状细胞(PSC)是胰腺纤维化的主要效应细胞,PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴,并表达Desmin蛋白,活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA)。PSC具有静息态与激活态两种,并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的A脂滴可以被油红O染成红色,阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现,原代分离的细胞培养6d,胞浆中仍可见明显的脂滴,传代后,橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。免疫细胞化学染色显示,细胞接种24h仍然表达Desmin48hDesmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA,随着培养时间的增长和传代次数的增加,细胞表达alpha-SMA,而不再表达Desmin,说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程,至培养第6d大多数细胞激活,传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型,目前研究发现:胰腺受损时,在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化,导致细胞形态、功能发生变化,促使基质增生、胶原蛋白的大量生成及不规则沉积。

5.方法简介:

公司实验室分离的大鼠胰腺星状细胞采用胶原酶制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的大鼠胰腺星状细胞经α-SMADesmin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基 FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1
、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
2
、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3
、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5
、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1
、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5
PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6
、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
黑化链霉菌   金头曲霉

鼠伤寒沙门菌冻干粉   粘液玫瑰单胞菌

大豆根瘤菌   栗酒裂殖酵母

泛养副球菌   光滑念珠菌冻干粉

酵米面假单胞菌(酵米面黄杆菌)   海滨芽孢杆菌
大鼠甘胆酸(CG)elisa检测试剂盒

大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa检测试剂盒

大鼠钙卫蛋白(CALP)elisa检测试剂盒

大鼠钙网蛋白(CRT)elisa检测试剂盒

大鼠钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK2)elisa检测试剂盒
大鼠胰腺星状细胞鹿次氧化酶elisa检测试剂盒

鹿红细胞膜蛋白(EMP)elisa分析检测试剂盒

鹿红细胞膜蛋白(EMP)elisa检测试剂盒免费代测

鹿环磷酸鸟苷(cGMP)elisa分析检测试剂盒

鹿环磷酸鸟苷(cGMP)elisa检测试剂盒

冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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