用途：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本小鼠抗中性粒细胞核周抗体（pANCA）elisa试剂盒实验方法含量。

小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)elisa试剂盒实验方法     英文名称：Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit      检测方法：elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存，操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题，收货后十五个工作日内包退换。 
英文名称：Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit
规格：96T/48T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状：盒装液体
人白介素2受体（IL-2R)Elisa测定试剂盒用途：科研与实验试剂，不得用于临床诊断。
标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)elisa试剂盒实验方法实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)elisa试剂盒实验方法样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或 者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上 清。
5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)elisa试剂盒实验方法操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。
2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。 注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸*拍干。
7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。 9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 
注意事项：
1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商， 如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)elisa试剂盒实验方法安全性
1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

大鼠表皮角化细胞*培养基100mL

苏云金芽胞杆菌亚毒亚种 Bacillus thuringiensis subsp. subtoxicus

米根霉 Rhizopus oryzae

大鼠肠巨噬细胞*培养基100mL

SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP试剂盒(带DAB显色液)3ml、18ml国产

人胰腺星状细胞*培养基100mL

NCTC 1469(小鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2

杆菌属 Lactobacillus sp.

人小气道上皮细胞*培养基100mL

少孢根霉

植物杆菌 Lactobacillus plantarum

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

泡盛曲霉变种 Aspergillus awamori var.

金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopliae

柠檬串珠菌 Leuconostoc citreum

中分子量单一蛋白Marker（35 kD）50次国产

白黄链霉菌 Streptomyces alboflavus

TE-10(人食管细胞)5×106cells/瓶×2

戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠肠动脉内皮细胞*培养基100mL

小鼠食管上皮细胞*培养基100mL

CW-2(人结肠细胞)5×106cells/瓶×2

WTRL1(大鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2

梭形芽孢杆菌 Bacillus fusiformis

5637(人膀胱细胞)5×106cells/瓶×2

黑曲霉 Aspergillus niger

人椎间盘髓核细胞*培养基100mL

节杆菌 Arthrobacter sp. Eicosapentaenoic Acid methyl ester （100 mg）5Z，8Z，11Z，14Z，17Z-eicosapentaenoic acid， methyl ester； EPA methyl ester； Eicosapentaenoic Acid methyl ester

Linoleoyl Ethanolamide-d4 （100 ug）N-（2-hydroxyethyl-1，1，2，2-d4）-9Z，12Z-octadecadienamide； Linoleoyl Ethanolamide-d4

Tafluprost ethyl amide （5 mg）N-ethyl-9α，11α-dihydroxy-15，15-difluoro-16-phenoxy-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-amide； Tafluprost ethyl amide

JWH 073 2’-naphthyl-N-（2-methylpropyl） isomer （10 mg）（1-isobutyl-1H-indol-3-yl）（naphthalen-2-yl）methanone； JWH 073 2’-naphthyl-N-（2-methylpropyl） isomer

JWH 081 6-methoxynaphthyl isomer （1 mg）（6-methoxy-1-naphthalenyl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 166； JWH 081 6-methoxynaphthyl isomer

JWH 072 （25 mg）1-naphthalenyl（1-propyl-1H-indol-3-yl）-methanone； JWH 072

Linoleic Acid （peroxide free） （250 mg）9Z，12Z-octadecadienoic acid； fairic Acid； Linoleic Acid （peroxide free）

9（E），11（E）-Conjugated Linoleic Acid （10 mg）9E，11E-octadecadienoic acid； 9E，11E-CLA|Isolinoleic Acid|Mangold’s acid； 9（E），11（E）-Conjugated Linoleic Acid

Ro 67-4853 （1 mg）N-（9H-xanthen-9-ylcarbonyl）-butyl ester-carbamic acid； Ro 67-4853

bpV（phen） （potassium hydrate） （25 mg）（PB-7-23-111’1’3）-oxodiperoxy（1，10-phenanthroline-k/V1，k/V10）-vanadate（1-）， potassium trihydrate； Potassium Bisperoxo（1，10-phenanthroline） oxovanadate （V）|Bisperoxovanadium（phen）； bpV（phen） （potassium hydrate）

1-（3-Chlorophenyl） piperazine （hydrochloride） （50 mg）1-（3-chlorophenyl）-piperazine， monohydrochloride； mCPP|meta-Chlorophenyl piperazine； 1-（3-Chlorophenyl） piperazine （hydrochloride）

小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)elisa试剂盒实验方法JWH 073 6-methoxyindole analog （5 mg）（1-butyl-6-methoxy-1H-indol-3-yl）（naphthalen-1-yl）methanone； JWH 073 6-methoxyindole analog

Idarubicin （hydrochloride） （10 mg）（7S，9S）-9-acetyl-7-[（3-amino-2，3，6-trideoxy-α-L-lyxo-hexopyranosyl）oxy]-7，8，9，10-tetrahydro-6，9，11-trihydroxy-5，12-naphthacenedione， monohydrochloride； 4-Demethoxydaunorubicin|4-DMD|NSC 256439； Idarubicin （hydrochloride）