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更新时间:2017-03-15
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小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)elisa试剂盒实验方法 操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)elisa试剂盒实验方法 英文名称:Mouse Histone Deacetylase,HD ELISA Kit 检测方法:elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存,操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题,收货后十五个工作日内包退换。
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)elisa试剂盒实验方法 一、标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)elisa试剂盒实验方法 二、注意事项
1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。
2. 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,
3. 浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。
4. 浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟
5. 若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。
6. 在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。
7. 加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。
8. 试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。
三、实验前准备
1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。
2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等
3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液
4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液
5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。
海球菌 Marinococcus sp.
人小细胞肺细胞英文名称:NCI-H446
莫格球拟酵母 Torulopsis mogii
猴菌
胎儿真皮成纤维细胞*培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
鲜绿青霉 Penicillium viridicatum
SHZ-88(大鼠腺细胞)5×106cells/瓶×2
FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)5×106cells/瓶×2
宛氏拟青霉 Paecilomyces variotii
人肾实质细胞*培养基100mL
MN-c, 小鼠皮质神经元gersion
毛柄金钱菌(金针菇)
IV型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL
大鼠神经胶质细胞*培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
热带假丝酵母 Candida tropicalis
黑木耳 Auricularia auricula
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis
细黄链霉菌 Streptomyces microflavus
NCI-H292(人肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
光帽鳞伞 Pholiota nameko
香菇 Lentinula edodes
羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
HO-8910(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
Misoprostol (free acid) (50 mg)9-oxo-11。alpha。,16-dihydroxy-16-methyl-prost-13E-en-1-oic acid; Misoprostol (free acid)
AK-7 (5 mg)N-(3-bromophenyl)-3-[(hexahydro-1H-azepin-1-yl)sulfonyl]-benzamide; AK-7
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E2 (1 mg)9-oxo-11。alpha。,15R,19R-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGE2; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E2
Prostaglandin F2α dimethyl amine (50 mg)N,N,-dimethyl-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-amine; Dinoprost dimethyl amine|PGF2α dimethyl amine; Prostaglandin F2α dimethyl amine
15-keto Prostaglandin F2α (1 mg)9α,11α-dihydroxy-15-oxo-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15-keto PGF2α; 15-keto Prostaglandin F2α
tetranor-PGFM (50 ug)9α,11α-dihydroxy-15-oxo-13,14-dihydro-2,3,4,5-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; tetranor-Prostaglandin F Metabolite; tetranor-PGFM
CAY10410 (1 mg)11-oxo-prosta-5Z,12E,14Z-trien-1-oic acid; 9,10-dihydro-15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2|9,10-dihydro-15-deoxy-Δ12,14-PGJ2; CAY10410
Leukotriene F4 (100 ug)5S-hydroxy-6R-(S-。gamma。-glutamylcysteinyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; LTF4; Leukotriene F4
5(R)-HETE (100 ug)5R-hydroxy-6E,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 5(R)-HETE
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)elisa试剂盒实验方法9(S)-HODE cholesteryl ester (100 ug)9S-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 9(S)-HODE cholesteryl ester
Half Volume 96-Well Solid Plate (black) (5 ea)Half Volume 96-Well Solid Plate (black)
8-Isoprostane EIA Antiserum (100 dtn)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane EIA Antiserum