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3004901493
产品型号:20mg
更新时间:2022-04-22
厂商性质:经销商
访问量:354
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中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
氯离子荧光探针(MQAE) | Chloride ion fluorescence probe | 20mg | GOY-F10141 |
产品详细介绍:
本品是使用广泛的一种新型氯离子荧光探针。MQAE的检测灵敏度比SPQ更高,并且荧光效果也比SPQ要好一些,是一种目前广泛应用的新型氯离子荧光探针。 CAS:162558-52-3 分子式:C14H16BrNO3 分子量:326.19 性状:黄色粉末 溶解性:可以溶解于DMSO,在水中的溶解度也较高。 MQAE以溴离子为配对阴离子,大激发波长约为355nm,大发射波长约为460nm。当氯离子浓度升高时,MQAE的荧光强度随着氯离子浓度的增加而成比例地减少。在氯离子浓度低于50mM时,MQAE的荧光强度几乎不受pH变化的影响。 MQAE的工作液可以配制于Krebs-HEPES缓冲液中。Krebs-HEPES缓冲液即为20mM HEPES,128mM NaCl,2.5mM KCl,2.7mM CaCl2,1mM MgCl2,16mM glucose,pH7.4。MQAE标记细胞时的浓度通常为5-10mM。以约800-1000万细胞每毫升的细胞密度,在含有5-10mM MQAE的Krebs-HEPES缓冲液中孵育30-60分钟。通常一个探针的装载体系为100微升即可。随后用Krebs-HEPES缓冲液或其它适当溶液洗涤5次左右,即可进行相应荧光测定。 注意事项:荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 储存条件:4℃,有效期12个月。 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISAKit 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名: 分子式:C21H32O3
兔氧化低密度脂蛋白 英文名称: Rabbit oxidized Low Density Lipoprotein 规格: 48T/96T 英文缩写: oxLDL Pemetrexed 137281-23-3 中文名:培美曲塞二钠 分子式:C20H21N5O6
兔血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷 分子式:C37H35N3O7
兔血小板衍化生长因子(rabbit PDGF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2 度:98.0%
聚酰胺粉(柱层析用,10-30目) Polyamide 质量规格:柱层析用,10-30目 大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA检测试剂盒RatProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T
氢二钠,二水(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydrate 质量规格:for HPLC, ≥99%(T) 人低氧诱导因子1α(HIF-1α)试剂盒 Human HIF-1α ELISA Kit
无水硫酸钠(农残级) sulfate anhydrous 质量规格:农残级 Ratniicoxide,NOELISAKit大鼠(NO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
无水硫酸钠(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrous 质量规格:for HPLC,≥99.0%(T) ERK蛋白共沉淀分析试剂盒5
(for HPLC,≥99.0%) bicarbonate 质量规格:for HPLC,≥99.0% MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4ELISA试剂盒小鼠结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
四丁基化铵(离子对色谱级) Tetrabutylammonium iodide 质量规格:离子对色谱级 小鼠亮酸丰富重复LGI家族成员3(LGI3)ELISA试剂盒 ,英文名: LGI3 ELISA Kit
三辛胺(离子对试剂) Trioctylamine 质量规格:离子对试剂 人肾小球组织糖基化终末产物(GTE-AGE)ELISA检测试剂盒HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 96T/48T
草酸钠容量分析用溶液标准物质(0.05M) oxalate solution 质量规格:0.05M 大鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)试剂盒 Rat platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit
刚果红(分析标准品,≥97.0%(HPLC)) Congo red 质量规格:分析标准品,≥97.0%(HPLC) 英文名称RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)规格:96T/48T
正癸酸(分析标准品,≥99.5%(GC)) Decanoic acid 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) 钙离子膜通道内质网利罗丁受体(ryanodinereceptor;RyR)功能荧光检测试剂盒20
氯离子荧光探针(MQAE)细胞CSF1R激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织CSK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞CSK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织C-MET激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞C-MET激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)