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产品型号：10mL
更新时间：2025-06-13
厂商性质：经销商
访问量：203
服务热线021-39596320
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
超级杂交液(原位杂交) | Super hybrid solution(In situ hybridization) | 10mL | GOY-F10153 |
产品详细介绍：
本产品为我司开发的即用型原位杂交专用核酸杂交液。既可以用于RNA原位杂交、DNA原位杂交，也可以用于FISH原位杂交等试验。 原位杂交是在一定生物结构基础之上的核酸杂交。这种结构基础可以是一条染色体；一个细菌；更大结构基础是细胞和组织。基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA 双键分子，应用带有标记的(有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素、等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位；用原位杂交技术，可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性，可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。 储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。 |
DNA提取流程图：
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔损伤分子-1(rabbit Kim-1) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷 分子式：C37H35N3O7
兔素(Renin)ELISA试剂盒 5-Benzyl D-glutamate 2578-33-8 中文名：D-谷5-苯甲酯 分子式：C12H15NO4 度：98.0%
兔素(Renin)ELISAKit 5-Benzoylpentanoic acid 4144-62-1 中文名：5-苯甲酰基戊酸 分子式：C12H14O3 度：98.0%
兔素(rabbit Renin) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 4-Aminosalicylic acid 中文名：4-氨基水杨酸 分子式：C7H7NO3 度：98.0%
兔瘦素(rabbit Leptin) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 5-Hydroxymethylfurfural 中文名：5-羟甲基糠醛 分子式：C6H6O3 度：%
克螨特标准溶液(1.00mg/ml) Propargite solution 质量规格：1.00mg/ml 人钙离子通道抗体(VGCC)ELISA检测试剂盒Humanvoltage-gatedcalciumchannel,VGCCELISAKit 96T/48T
三氯杀虫酯标准溶液(10μg/ml,u=2%) Plifenat solution 质量规格：10μg/ml,u=2% 大鼠血栓素合成酶(TXAS)试剂盒 Rat thromboxane syhase,TXAS ELISA Kit
三氯杀虫酯标准溶液(100μg/ml,u=2%) Plifenat solution 质量规格：100μg/ml,u=2% 英文名称RatTumornecrosisfactorαELISAKIT大鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISAKIT规格：96T/48T
霜霉威(分析标准品,99%) Propamocarb 质量规格：分析标准品,99% 肝素(heperin)活性比色法定量检测试剂盒20
解毒喹(标准品) Cloquintocet-mexyl 质量规格：分析标准品 ELISAKitPCDH1人原钙黏素1规格：48T/96T
绿麦隆标准溶液(100μg/ml,u=4%) Chlortoluron solution 质量规格：100μg/ml,u=4% 小鼠克拉拉细胞蛋白16(CC16)ELISA试剂盒 ，英文名： CC16 ELISA Kit
敌草隆(99%) Diuron 质量规格：0.99 人抗鼠抗体(HAMA)ELISA检测试剂盒Humanaimousaibody,HAMAELISA 96T/48T
四螨嗪(分析标准品,98.6%) Clofentezine 质量规格：分析标准品,98.6% 大鼠血栓素B2(TXB2)试剂盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
非草隆(标准品) Fenuron 质量规格：分析标准品 英文名称RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2)规格：96T/48T
丁(B9)(标准品) Daminozide 质量规格：分析标准品 肝素(heperin)纤维蛋白检测法(Fibrometer)分析试剂盒50
超级杂交液(原位杂交)细胞PKD2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
组织PKCι激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
细胞PKCι激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
组织PKCθ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
细胞PKCθ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
