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当前位置:首页产品中心分子生物学试剂探针标记及检测100mL超级杂交液(不含甲酰胺)

超级杂交液(不含甲酰胺)
产品简介:

超级杂交液(不含甲酰胺)公司正*的各种产品组织诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性荧光定量检测试剂盒
血液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性荧光定量检测试剂盒
体液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性荧光定量检测试剂盒
细胞结构型内皮细胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性荧光定量检测试剂盒

产品型号:100mL

更新时间:2025-06-13

厂商性质:经销商

访问量:328

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超级杂交液(不含甲酰胺)

Super hybrid   solution(formamide free)

100mL

GOY-F10156

产品详细介绍:

核酸杂交一般是指用一种标记的核酸探针与印迹膜上的核酸进行杂交,由此检测印迹膜上是否存在与探针同源的核酸分子(靶分子)。核酸杂交是分子生物学的基本技术之一,应用非常广泛。由于核酸杂交效率受印迹膜种类、杂交温度、探针浓度、杂交液离子强度、杂交液pH及杂交液粘度等因素影响

产品特点:

1. 既可用于Southern杂交(靶分子为DNA),也可用于和Northern杂交(靶分子为RNA),还可以用于菌落杂交,基因芯片等杂交。

2. 既可以用于同位素探针的杂交,也可以用于非同位素探针的杂交。

3. 既可以使用DNA(包括DNA Oligo)探针,也可以使用RNA探针(包括RNA Oligo)

4.含多种能够促进杂交的聚合物,使杂交反应能在612小时完成,而常规杂交反应一般需要1224小时。

5.含多种封堵剂,能阻印迹膜对探针分子的非特异性吸附,能有效降低背景信号,延长曝光时间以便检测到低拷贝的RNA(Northern)和单拷贝的基因(Southern)

6. A型不含甲酰胺,B型含50%的甲酰胺。后者使杂交在较低温度就可以完成,适合Tm 较高的分子杂交(RNA-RNARNA-DNA杂交)

7.跟各种常用的印迹膜兼容,包括硝酸纤维素膜和尼龙膜。

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。本产品属于高盐溶液,低温下产生沉淀,必须在65℃加热溶解并充分摇匀后才能使用。

 

操作步骤:
1.
匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅
b.
单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(3.5cm直径的培养板)1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNADNA污染。
c
.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2
.将匀浆样品在室温(15-30)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3
.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-810000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8
10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅
7.
把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8
10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔乳铁传递蛋白elisa试剂盒   兔乳铁传递蛋白试剂盒   规格型号:96T/48T   兔乳铁传递蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔乳铁传递蛋白试剂盒、兔乳铁传递蛋白elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  7745-40-6  中文名:  分子式:C21H32O3  度:98.0%   

兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISAkit     5-Aminouracil  932-52-5  中文名:5-氨基  分子式:C4H5N3O2  度:98.0%    

(LZM)ELISAKit     5-Aminosalicylic acid  中文名:5-氨基水杨酸  分子式:C7H7NO3  度:98.0%

兔热休克蛋白90elisa试剂盒   兔热休克蛋白90试剂盒   规格型号:96T/48T   兔热休克蛋白90试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔热休克蛋白90试剂盒、兔热休克蛋白90 elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名:5-苯并咪唑甲酸  分子式:C8H6N2O2 

兔热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒              5-Benzoylpentanoic acid  中文名:5-苯甲酰基戊酸  分子式:C12H14O3
二甲戊乐灵(分析标准品,99%)  Pendimethaline  质量规格:分析标准品,99% 大鼠FMS样酪激酶3(Flt3)ELISA检测试剂盒RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 96T/48T

氯菊酯(标准品)  Permethrin (isomers) solution  质量规格:分析标准品 人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)试剂盒 Human LMP7/PSMB9 ELISA Kit

残杀威标准溶液(100μg/ml,u=2%)   Propoxur solution  质量规格:100μg/ml,u=2% RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒规格:96T/48T

草甘膦(分析标准品,99.5%)  N-(Phosphonomethyl)glycine  质量规格:分析标准品,99.5% FLAG(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

草甘膦标准溶液(100μg/ml,u=2%)  N-(Phosphonomethyl)glycine solution  质量规格:100μg/ml,u=2% MousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISA试剂盒小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

草甘膦标准溶液(10μg/ml,u=2%)  N-(Phosphonomethyl)glycine solution  质量规格:10μg/ml,u=2% 小鼠可溶性血栓调节蛋白(sTM)ELISA试剂盒 ,英文名: sTM ELISA Kit

(分析标准品,99%)  Phoxim  质量规格:分析标准品,99% 大鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA检测试剂盒Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 96T/48T

除草醚标准溶液(10μg/ml,u=5%)  Nitrofen solution  质量规格:10μg/ml,u=5% 人登革热抗体IgM(DF-Ab IgM)试剂盒 Human dengue fever aibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kit

2-萘氧乙酸(标准品)  2-Naphthoxyacetic acid  质量规格:分析标准品 RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

灭菌丹标准溶液(100μg/ml,u=2%)  N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution  质量规格:100μg/ml,u=2% FLUORIDE血液抗凝液100毫升
超级杂交液(不含甲酰胺)组织PKCβ2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞PKCβ2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织PKCβ1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞PKCβ1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织PKCα激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

实验步骤
(1)
实验开始前将RNA提取液于65水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65
水浴3-10 min,期间混匀2-3
(4)
加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V体积10M LiCl溶液,4放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4
离心20min
(8)
弃上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V体积的无水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
离心20 min
(12)
弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC处理水溶解
(14)
用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(
在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)


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