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当前位置:首页产品中心分子生物学试剂探针标记及检测5次PCR法DNA探针标记试剂盒

PCR法DNA探针标记试剂盒
产品简介:

PCR法DNA探针标记试剂盒公司正*的各种产品植物过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性荧光定量检测试剂盒
细胞二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量检测试剂盒
组织二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量检测试剂盒
血液二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量检测试剂盒
体液二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量检测试剂盒

产品型号:5次

更新时间:2025-06-13

厂商性质:经销商

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产品介绍

下列是产品的订购信息!产品仅用于科研

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PCRDNA探针标记试剂盒

PCR DNA   Labeling Kit

5

GOY-F10167

产品详细介绍:

产品特点: 1.一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。。

2. 足够1050μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)550μl体系的标记反应。

3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针,足够多次杂交实验用。

4. 既可用于制备双链探针,也可以用于单链探针。

5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP90604B90604C分别含和标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTPhydroxycoumarin-dUTPresorufin-dUTPaminoallyl-dUTP等。

6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记),有效降低了空间阻碍,检测效果佳。

7.可以用于SouthernNorthern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

注:标记专用PCR Mix不含dNTP

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

DNA提取流程图:

QQ截图20220414142532.png

实验步骤
(1)
实验开始前将RNA提取液于65水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65
水浴3-10 min,期间混匀2-3
(4)
加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V体积10M LiCl溶液,4放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4
离心20min
(8)
弃上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V体积的无水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
离心20 min
(12)
弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC处理水溶解
(14)
用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(
在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1.
匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅
b.
单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(3.5cm直径的培养板)1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNADNA污染。
c
.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2
.将匀浆样品在室温(15-30)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3
.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-810000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8
10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅
7.
把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8
10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔抗脑组织抗体elisa试剂盒   兔抗脑组织抗体试剂盒   规格型号:96T/48T   兔抗脑组织抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔抗脑组织抗体试剂盒、兔抗脑组织抗体elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  中文名:  分子式:C19H18N2O3S 

兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISAKit     5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  231278-84-5  中文名:  分子式:C26H17ClFN3O3  度:98.0%  关键词: 

兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒     5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  144809-28-9  中文名:  分子式:C19H18N2O3S 

兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISAKit     5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名:  分子式:C21H32O3  度:98.0%

兔巨噬细胞炎症蛋白-5(rabbit MIP-5)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装     5-Hydroxymethylfurfural  中文名:5-羟甲基糠醛  分子式:C6H6O3
(R)-(-)-2,2,2-
三氟-1-(9-蒽基)(>99.0%(GC))   (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol  质量规格:>99.0%(GC) HumanAlpha1Aichymoypsin,AACTELISA试剂盒人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA试剂盒规格:96T/48T

(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)(>99.0%(GC))  (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol   质量规格:>99.0%(GC) 植物β13D葡聚糖合成酶活性比色法定量检测试剂盒20

N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟脑磺内酰胺(>98.0%(HPLC)(T))  N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam  质量规格:>98.0%(HPLC)(T) Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格:96T/48T

对茴香酸(>99.0%(GC)(T))  p-Anisic Acid  质量规格:>99.0%(GC)(T) 小鼠可溶性Toll样受体9(sTLR9/sCD289)ELISA试剂盒 ,英文名: sTLR9/sCD289 ELISA Kit

9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T))  9-Anthracenecarboxylic Acid  质量规格:>97.0%(GC)(T) 大鼠双氢(DHT)ELISA检测试剂盒RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T

5-(4-甲氧羰基)-10,15,2-三卟吩(>90.0%(HPLC))  5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin  质量规格:>90.0%(HPLC) 人蛋白酶3抗体(PR3Ab)试剂盒 Human Proteinase 3 Aibody,PR3Ab ELISA Kit

2-萘甲酰氯(>98.0%(GC)(T))  2-Naphthoyl Chloride  质量规格:>98.0%(GC)(T) Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒规格:96T/48T

4-二甲基氨基肉桂醛(>98.0%(T))  4-Dimethylaminocinnamaldehyde  质量规格:>98.0%(T) GILLS苏木素复染试剂盒50

2,3-萘二羧酸酐(>95.0%(GC)(T))  2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydride  质量规格:>95.0%(GC)(T) Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISA试剂盒小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T

2,4,6-(十五氟庚基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))  2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine  质量规格:>98.0%(GC) 小鼠可溶性Toll样受体4(sTLR4)ELISA试剂盒 ,英文名: sTLR4 ELISA Kit
PCR
DNA探针标记试剂盒细胞IRAK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织IKKβ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞IKKβ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织IKKα激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞IKKα激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C


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