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3004901493
产品型号:50μL
更新时间:2025-06-13
厂商性质:经销商
访问量:345
021-39596320
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产品详细介绍:
CECF 具有4~5 个负电荷,pH7~8,有助于在胞内滞留。其AM 形式的乙酰酯衍生物具有膜透性,可以被动穿过细胞膜。且BCECF,AM 本身不发出荧光,通过胞内酯酶作用后成为BCECF 发出荧光信号,可以作为细胞活力的判断依据之一。 修饰AM 乙酸酯集团上的羧酸,使之不带电荷,可以渗透进入细胞膜,一旦进入细胞,其亲脂保护基团可以被酯酶非特异性的脱去,成为带电荷形式,相较于原来的AM 形式,带电荷形式在胞内可以更久的滞留。 BCECF 也用于灌注组织,细胞间隙,植物细胞,对细菌和酵母进行pH 测量。BCECF,AM 可以用于检测细胞生存能力,细胞毒性,凋亡、粘附和多药耐药性以及趋化性等多种功能性检测。 本试剂为储液浓度,保存于-20℃,如需进行连续性实验,请尽快用完。如果储液在大于400nm 下有很强的吸光度说明溶液中含有较多的水分,就必须被稀释立刻使用,而不能被储存。BCECF,AM 通常应该是无色无荧光信号。 浓度:5mM in 无水DMSO 储存:-20℃,避光,有效期6个月 |
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
细胞pH指示荧光探针 | BCECF, AM | 50μL | GOY-F10168 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 中文名: 分子式:C8H8OS2 度:98.0%
兔结缔组织生长因子(rabbit CTGF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 239463-72-0 中文名: 分子式:C22H25N3O2 度:98.0% 关键词:
兔交联物(PY)ELISA试剂盒 5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 183288-46-2 中文名: 分子式:C13H15N3O2 度:98.0% 关键词:
兔交联物(PY)ELISAKit 4-Chloro-6-iodoquinazoline 98556-31-1 中文名: 分子式:C8H4ClIN2
兔交联物(PY)ELISAKit 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 中文名: 分子式:C14H10BrN 度:98.0%
2,4,6-三(五氟乙基)-1,3,5-三嗪(>95.0%(GC)) 2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine 质量规格:>95.0%(GC) 大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA检测试剂盒Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 96T/48T
2,4,6-三(七氟丙基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine 质量规格:>98.0%(GC) 人蛋白酶3(PR3)试剂盒 Human PR3 ELISA Kit
α-巯基甘油(>98.0%(GC)(T)) α-Thioglycerol 质量规格:>98.0%(GC)(T) Ratp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit大鼠P53(P53)ELISA试剂盒规格:96T/48T
3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸(>99.0%(GC)(T)) 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid 质量规格:>99.0%(GC)(T) GMEM培养基1/10升(片剂)
4'-羟基偶氮苯-2-羧酸(>98.0%(HPLC)(T)) 4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic Acid 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA试剂盒小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒规格:96T/48T
4'-羟基苯偶氮基-4-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T)) 4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid Hydrate 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒 ,英文名: sTLR2 ELISA Kit
羧基甲氧基胺半盐酸盐(>98.0%(T)) Carboxymethoxylamine Hemi 质量规格:>98.0%(T) 大鼠A(VA)ELISA检测试剂盒RatVitaminA,VAELISAKit 96T/48T
吉拉德试剂 P(>95.0%(T)) Girard's Reagent P 质量规格:>95.0%(T) 人蛋酸酶2(2A),催化亚基,β亚型(PPP2CB)试剂盒 Human PPP2CB ELISA kit
4--1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量:23.50-24.30 %) 4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione 质量规格:含氮量:23.50-24.30 % RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-叔丁基-α-硝酮(>98.0%(HPLC)(T)) N-tert-Butyl-α-phenylnitrone 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) GMS10电击感受态细菌转化试剂盒10
细胞pH指示荧光探针组织GSK3激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞GSK3激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织GSK3β激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞GSK3β激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织GSK3α激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。