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当前位置:首页产品中心分子生物学试剂探针标记及检测1mgFluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)

Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)
产品简介:

Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)公司正*的各种产品细胞半胱-4(CASPASE-4)活性荧光定量检测试剂盒
组织半胱-4(CASPASE-4)活性荧光定量检测试剂盒
细胞半胱-5(CASPASE-5)活性比色法定量检测试剂盒
组织半胱-5(CASPASE-5)活性比色法定量检测试剂盒
细胞半胱-5(CASPASE-5)活性荧光定量检测试剂盒

产品型号:1mg

更新时间:2025-06-13

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Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)

Fluo-4, AM

1mg

GOY-F10175

产品详细介绍:

Fluo-2早是由Roger Tsien博士发明的钙离子指示剂Fluo系列之一,目前,Fluo-3Fluo-4已成熟商品化。然而,Fluo-2在细胞内比Fluo-4要更明亮,主要可能是由于大部分细胞对FLuo-2的加载能力要高于FLuo-4

Fluo-3成像涉及到钙离子信号通路的多个方面,Fluo-3经常应用在流式细胞术上,如螯合剂光活化、第二信使、神经递质以及细胞水平的药理筛选。Fluo-3在这些应用里之所以能大量运用主要是由于其几个重要特性:Fluo-3可以被氩离子激光器488nm激发,并在与Ca2+结合后,发射荧光很明亮的荧光信号。Fluo-4Fluo-3以两个氟原子取代氯原子的类似物,这一微小的结构变化使得Fluo-4探针在488nm激发光下的荧光信号得到增强,信号稳定持续,可以应用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、微孔板读数仪。

Fluo-2Fluo-3Fluo-4在与Ca2+结合后荧光增强,与紫外激发的探针fura-2indo-1不同,不会发生光谱漂移。荧光光密度在与Ca2+结合后,增强至少100倍。

浓度:1mM in无水DMSO

储存:-20℃,避光,有效期12个月。

DNA提取流程图:

QQ截图20220414142532.png

实验步骤
(1)
实验开始前将RNA提取液于65水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65
水浴3-10 min,期间混匀2-3
(4)
加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V体积10M LiCl溶液,4放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4
离心20min
(8)
弃上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V体积的无水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
离心20 min
(12)
弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC处理水溶解
(14)
用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(
在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1.
匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅
b.
单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(3.5cm直径的培养板)1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNADNA污染。
c
.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2
.将匀浆样品在室温(15-30)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3
.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-810000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8
10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅
7.
把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8
10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔合酶   英文名称:   Rabbit Total Niic Oxide Syhase   规格:   48T/96T   英文缩写:   T-NOS  Albendazole  中文名:  分子式:C12H15N3O2S  度:98.5%

兔合成酶(NOS)ELISA试剂盒     5-O-Ethylcleroindicin D  488138-32-5  中文名:  分子式:C10H16O4 

兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γelisa试剂盒   兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒   规格型号:96T/48T   兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ试剂盒、兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile  中文名:  分子式:C15H19N3O5 

兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISAKit                 Acyclovir  中文名:阿昔洛韦  分子式:5O3 

兔胱抑素C(rabbit Cystatin C)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装     5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  中文名:  分子式:C13H15N3O2
5-
甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))  5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate   质量规格:>98.0%(T) MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISA试剂盒小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒规格:96T/48T

1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))  1,10-Phenanthroline-5,6-dione  质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA试剂盒 ,英文名: sCD30 ELISA Kit

TPP(=四卟啉)  TPP (=Tetraphenylporphyrin)   质量规格:铜用高灵敏分光光度试剂 大鼠D(VD)ELISA检测试剂盒RatVitaminD,VDELISAKit 96T/48T

TCPP[=(4-)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))  TCPP [=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin]   质量规格:>97.0%(HPLC)(T) 人蛋白精甲基转移酶1(PRMT1)试剂盒 Human PRMT1 ELISA Kit

偶氮甲碱H(>97.0%(T))  Azomethine H   质量规格:>97.0%(T) RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T

N-甲基糠酰羟肟酸(>99.0%(HPLC))  N-Methylfurohydroxamic Acid   质量规格:>99.0%(HPLC) GMS10细菌1毫升

2,2'-二辛可宁酸二钾盐水合物(>98.0%(HPLC))  2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate   质量规格:>98.0%(HPLC) MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA试剂盒小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格:96T/48T

氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))  Chloranilic Acid  质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠颗粒体蛋白(GRN)ELISA试剂盒 ,英文名: GRN ELISA Kit

焦棓酚红  Pyrogallol Red  质量规格:螯合剂 人腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA检测试剂盒Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit 96T/48T

锌试剂  Zincon  质量规格:螯合剂 大鼠血栓前体蛋白(TpP)试剂盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR
分析-钙离子指示探针)细胞CDK2/CYCLIN E激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织CDK2/CYCLIN A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞CDK2/CYCLIN A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织CDK1/CYCLIN B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞CDK1/CYCLIN B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C


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