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产品型号：150T
更新时间：2025-08-09
厂商性质：经销商
访问量：328
服务热线021-39596320
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DNA提取流程图：
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
7-AAD细胞活力染色液 | 7-AAD Viability Staining Solution | 150T | GOY-F10198 |
产品详细介绍：
本品为7-AAD的即用型染色液，可直接用于细胞染色，其大激发波长为546nm，大发射波长为647nm，可在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。若每次（含1×105个细胞）用量10μl，本品可供检测150次。 7-Aminoactinomycin D，简称7-AAD，是一种核酸染料，与DNA结合后可发出强烈的荧光，其荧光特性与PI相似，可被488nm氩离子激光激发，但其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的佳替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC，PE等。 另外，7-AAD是一种非渗透性荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合，可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞，广泛用于流式细胞术检测。 注意事项 1）7-AAD为潜在致癌物质，操作时请穿戴手套、眼罩以及其他防护措施，以避免接触皮肤。 2）玻璃器皿上残留的去垢剂也会影响染色的效果，导致细胞存在或不存在都会出现强荧光。玻璃器皿的清洗应用去垢剂，然后用自来水冲洗数遍后，用去离子水或蒸馏水漂洗。 3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用方法 【注】：7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。 样品在完成其他染色后，取0.5ml细胞悬液（～1×105个细胞），加入约10μl 7-AAD细胞活力染色剂，根据其激发发射波长（Ex/Em=545nm/650nm）在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。 储存条件：4℃避光干燥 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
同型半胱酸（Hcy）测定试剂盒（酶循环法） 4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone 2549-87-3 中文名：4-丙烯氧基-2-羟基二苯甲酮 分子式：C16H14O3 度：99.0% 关键词：
铁蛋白 英文名称： human Ferritin 规格： 48T/96T 英文缩写： Fe 4-Acetamidophenol 103-90-2 中文名：对乙酰氨基酚 分子式：C8H9NO2 度：98.0% 关键词：
铁测试盒 Iron test case 4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide 119018-29-0 中文名： 分子式：C16H21N3O4S 度：98.0% 关键词：
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甜菜碱含量测定试剂盒 可见分光光度法 50管/48样 4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di 106261-49-8 中文名：甲磺酸伊马替尼 分子式：C13H20Cl2N2O2 度：98.0% 关键词：
120；7-氨基-4-甲基(AMC) 7-Amino-4-methylcoumarin 质量规格：>97% 大鼠结蛋白(Des)ELISA检测试剂盒RatDesmin,DesELISAKit 96T/48T
Duvelisib (IPI-145) IPI-145 (INK1197) 质量规格：>98%,选择性的PI3K δ/γ抑制剂 人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)试剂盒 Human MCP-2 ELISA kit
5--4-氯-3吲哚神经钠盐 X-NeuNAc 质量规格：>98%,美国进口 RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit小鼠孕同受体(PROGR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
ABEI；N-（4-氨丁基）-N-乙基异鲁米诺 N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol 质量规格：>97%,进分 Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS)500毫升
TTAC；十四烷基三甲基氯化铵 Tetradecyltrimethylammonium chloride 质量规格：>99%,AR Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISA试剂盒小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
DTAC；十二烷基三甲基氯化铵 Dodecyltrimethylammonium chloride(DTAC) 质量规格：>99%,BR 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒 ，英文名： TPO-Ab ELISA Kit
CTAC;十六烷基三甲基氯化铵 CTAC 质量规格：>99% 大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA检测试剂盒RatMyosinELISAKit 96T/48T
十八烷基三甲基氯化铵 Stearyl Trimethyl Ammoium Chloride(STAC) 质量规格：>99%,BR 人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)试剂盒 Human MCP-1 ELISA kit
十烷基三甲基氯化铵 Decyltrimethylammonium chloride 质量规格：>99% RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit大鼠孕同受体(PROGR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
辛基三甲基氯化铵;八烷基三甲基氯化铵 Trimethyloctylammonium chloride 质量规格：>99%,BR Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS)不含NaHCO3500毫升
7-AAD细胞活力染色液细胞尿激酶（UROKINASE）活性荧光定量检测试剂盒
?基质金属1抑制剂
0.2摩尔基质金属2/9抑制剂卡托普利（captopril）
基质金属3抑制剂（NNGH）
胶原酶潜酶活化剂（APMA）
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
