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3004901493
产品型号:1mL
更新时间:2022-04-22
厂商性质:经销商
访问量:333
021-39596320
DNA提取流程图:
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
荧光定量PCR Mix(染料法) | 2×SYBR qPCR Mix | 1mL | GOY-F10254 |
产品详细介绍:
本产品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR分析(qPCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及荧光染料等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应和HRM分析,具有广泛的用途。 产品特点: 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量PCR实验。 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制PCR反应。 快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为50拷贝/mL的靶分子。 保存:-20℃,有效期6个月。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人脂肪酶(Lipase)ELISA试剂盒 2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone 中文名: 分子式:C11H7NO4
人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒 2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone 103646-20-4 中文名: 分子式:C11H7NO4 度:% 关键词:
人脂多糖结合蛋白elisa试剂盒 人脂多糖结合蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 人脂多糖结合蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人脂多糖结合蛋白试剂盒、人脂多糖结合蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 2-Benzylacrylic acid 5669-19-2 中文名: 分子式:C10H10O2
人脂多糖结合蛋白(LBP)酶联吸附测定试剂盒 Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit 2-Aminophenyl phenyl sulfone 中文名:2-氨基二苯砜 分子式:C12H11NO2S
人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone 103646-20-4 中文名: 分子式:C11H7NO4
氯化血红素;血晶素 Hemin 质量规格:0.98 大鼠抗IVIgG抗体ELISA检测试剂盒Ratai-IVIgGaibodyELISAKit 96T/48T
5- 羧基荧光素二乙酸酯;5-CFDA 5-Carboxyfluorescein diacetate 质量规格:0.95 人雌二(E2)试剂盒 Human Esadiol,E2 ELISA Kit
5(6)-羧基荧光素二乙酸酯 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate 质量规格:0.9 RatsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
5-氨基荧光素 5-Aminofluorescein 质量规格:>95% IL蛋白共沉淀分析试剂盒5
6-氨基荧光素 6-Aminofluorescein 质量规格:0.95 NudeMouseClaracellprotein,CC16ELISA试剂盒裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒规格:96T/48T
5(6)-氨基荧光素 5(6)-Aminofluorescein 质量规格:0.9 小鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA 试剂盒
5-FAM, SE;5-羧基荧光素琥珀酯 5-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester 质量规格:0.9 Rat soluble cell differeiation aigen 14 (sCD14) ELISA Kit 大鼠可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)ELISA试剂盒
5,6-FAM;5(6)-羧基荧光素 5(6)-Carboxyfluorescein 质量规格:0.95 Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit 人酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基荧光素琥珀酯 5(6)-FAM, SE 质量规格:>90% Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISA试剂盒人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
S-腺苷-L-蛋;S-腺苷甲硫 S-adenosyl-L-mine (SAM) 质量规格:BR,度>96%,干品腺苷蛋>49% 植物精(arginine)含量化学比色法定量检测试剂盒20
荧光定量PCR Mix(染料法)植物亚硝酸盐还原酶总活性比色法定量检测试剂盒
藻类细胞硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒
真菌/酵母细胞硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒
植物硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒
植物谷氨酰半胱合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量检测试剂盒
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)