添加QQ号
3004901493
产品型号:0.5mL
更新时间:2022-04-22
厂商性质:经销商
访问量:195
021-39596320
相关文章
DNA提取流程图:
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
dNTP溶液(10mM) | dNTP Solution,10mM | 0.5mL | GOY-F10271 |
产品详细介绍:
本产品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种核苷酸的混合液,每种核苷酸的浓度为10mM,纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。使用浓度根据具体的反应决定,请参考相关手册。 储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3Gelisa试剂盒 人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒 规格型号:96T/48T 人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒、人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 2-Chloro-1-(5'-(prop-1-ynyl)-2,2'-bithiophen-5-yl)ethanol 中文名: 分子式:C13H11ClOS2
人丝切蛋白1(CFL1)酶联吸附测定试剂盒 Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit 2-Aminofluorene 中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N
人瘦素受体(LEPR)ELISAKit Tiagabine 中文名:盐酸噻加宾 分子式:C20H26ClNO2S2
人瘦素 (Leptin) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 α-Spinasterone 23455-44-9 中文名: 分子式:C29H46O
人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISAKit 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide 24522-30-3 中文名: 分子式:C10H7F3N2O
奎宁单盐酸盐二水合物 Quinine dihydrate 质量规格:>99% 英文名称Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T
1-甲基-1,2,4-三唑 1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE 质量规格:>98% 寡核苷酸探针同位素法RNA北方杂交*试剂盒5
甲啶铂,吡铂 Picoplatin 质量规格:>99%,BR ELISAKitIGF-1人胰岛素样生长因子1规格:48T/96T
4-硝基苄眯盐酸盐 4-NitrobenziMidaMide HCl 质量规格:>97% 小鼠激活素AB(ACVAB)ELISA试剂盒 ,英文名: ACVAB ELISA Kit
脲,尿素 Urea 质量规格:AR 人硫酸角质素(KS)ELISA检测试剂盒Humankeratansulfate,KSELISAKit 96T/48T
脱氢诺龙醋酸酯 Dehydronandrolon 质量规格:>96% 大鼠腺苷三0酸结合盒转运体A1(ABCA1)试剂盒 Rat ATP-binding Cassette anspoer A1,ABCA1 ELISA Kit
延胡索酸/富马酸/ 反丁烯二酸 Fumaric acid 质量规格:AR,99% 英文名称Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血红素氧合酶2(HO-2)规格:96T/48T
甲磺酸达氟 Danofloxacin mesylate 质量规格:>98%,BR 光镜样品固着液(10%Formalin固着液)50毫升
甲磺酸达氟(标准品) Danofloxacin mesylate 质量规格:HPLC>98%,标准品 ELISAKitISR-β人胰岛素受体β规格:48T/96T
海藻酸钙 Calcium Alginate 质量规格:AR,99% 小鼠激活素A(ACVA)ELISA试剂盒 ,英文名: ACVA ELISA Kit
dNTP溶液(10mM)组织环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量检测试剂盒
细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量检测试剂盒
体液环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量检测试剂盒
组织环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量检测试剂盒
细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量检测试剂盒
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)