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3004901493
产品型号:250μl
更新时间:2022-04-22
厂商性质:经销商
访问量:198
021-39596320
DNA提取流程图:
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
dTTP溶液(100mM) | dTTP Solution | 250μl | GOY-F10278 |
产品详细介绍:
dTTP即2’-deoxythymidine 5’-triphosphate,中文名为脱氧胸苷三磷酸,常用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。 分子式:C10H14N2O14P3Na3 分子量:548.1(酸形式的分子量为482.1) 大吸收波长:267nm。 本dTTP溶液用纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为100mM,即100mmol/L。 本dTTP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。 本dTTP溶液经测试,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。 储存条件:-20℃。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人抗单核细胞抗体(AMA)ELISAKit Timosaponin AIII 41059-79-4 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13 度:98.5% 关键词: 知母; 螺甾烷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
人抗α-胞衬蛋白抗体IgGelisa试剂盒 人抗α-胞衬蛋白抗体IgG试剂盒 规格型号:96T/48T 人抗α-胞衬蛋白抗体IgG试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人抗α-胞衬蛋白抗体IgG试剂盒、人抗α-胞衬蛋白抗体IgGeisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Aloe-emodin 中文名:芦荟大黄素 分子式:C15H10O5
人晶体蛋白βelisa试剂盒 人晶体蛋白β试剂盒 规格型号:96T/48T 人晶体蛋白β试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人晶体蛋白β试剂盒、人晶体蛋白βeisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Periplogenin 514-39-6 中文名:杠柳苷元 分子式:C23H34O5
人金葡菌肠elisa试剂盒 人金葡菌肠试剂盒 规格型号:96T/48T 人金葡菌肠试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人金葡菌肠试剂盒、人金葡菌肠elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Lonidamine 50264-69-2 中文名:氯尼达明 分子式:C15H10Cl2N2O2 度:98.0% 关键词:
人解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISAKit 3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid 中文名: 分子式:C17H23NO5 度:98.0%
A 83-01;A83-01 A8301 质量规格:>98%,BR 大鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA检测试剂盒Ratansferrieceptor,TFRELISAKit 96T/48T
Amresco 进分琼脂粉 Agar 质量规格:BR,进分 人成纤维细胞生长因子13(FGF-13)试剂盒 Human FGF-13 ELISA Kit
氟伏沙明 Fluvoxamine 质量规格:>98%,油状 RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit大鼠氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
醋酸锌(二水) Zinc acetate 质量规格:AR,>98% JNK/SAPK(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
舒巴坦钠 Sulbactam 质量规格:BR,>99% PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISA试剂盒植物吲哚乙酸(IAA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
舒巴坦钠(标准品) Sulbactam 质量规格:HPLC>98%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP-2 ELISA Kit
甘草酸(β型),18beta-甘草酸 18-beta-glycyrrheticacid 质量规格:>98% 大鼠骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)ELISA检测试剂盒RatBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 96T/48T
甘草酸(β型),18beta-甘草酸(标准品) 18-beta-glycyrrheticacid 质量规格:HPLC>98%,标准品 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)试剂盒 Human FGF10 ELISA Kit
OXOID胰蛋白胨 Tryptone 质量规格:BR,进口 Rattarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA试剂盒规格:96T/48T
β-萘黄酮 β-Naphthoflavone 质量规格:>99%,进分 JNK/SAPK蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
dTTP溶液(100mM)组织硫氧还蛋白还原酶2(mito thioredoxin reductase 2)活性比色法定量检测试剂盒
细胞硫氧还蛋白还原酶2(mito thioredoxin reductase 2)活性比色法定量检测试剂盒
组织硫氧还蛋白还原酶1(cytosolic thioredoxin reductase 1)活性比色法定量检测试剂盒
细胞硫氧还蛋白还原酶1(cytosolic thioredoxin reductase 1)活性比色法定量检测试剂盒
组织硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reduct
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)