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产品型号：20μL×400次
更新时间：2022-04-22
厂商性质：经销商
访问量：358
服务热线021-39596320
DNA提取流程图：
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
PCR MasterMix | 2×PCR MasterMix | 20μL×400次 | GOY-F10284 |
产品详细介绍：
本制品中含有2×Taq DNA Polymerase，2×PCR Buffer，2×dNTP，只需加入适量引物、模板和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作，使操作更加快捷，也减少了PCR操作过程中可能导致的污染，使PCR的重复性更好。 产品用途： 利用2×PCR Master Mix可以进行各种常规的PCR扩增，特别适合用于定性和半定量的PCR扩增，以及2kb以下DNA片段的T载体克隆。 产品特点： 本产品可以扩增出长达8kb的片段，但通常更适合用于扩增2kb以下的DNA片段。 本产品稳定性高，经测试，反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。 保存：-20℃，至少一年有效。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP/α1M)酶联吸附测定试剂盒 Human AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid 104239-97-6 中文名： 分子式：C19H28INO3
人T细胞活化连接蛋白elisa试剂盒 人T细胞活化连接蛋白试剂盒 规格型号：96T/48T 人T细胞活化连接蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人T细胞活化连接蛋白试剂盒、人T细胞活化连接蛋白elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Sitafloxacin 127254-12-0 中文名：西他 分子式：C19H18ClF2N3O3
人P糖蛋白elisa试剂盒 人P糖蛋白试剂盒 规格型号：96T/48T 人P糖蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人P糖蛋白试剂盒、人P糖蛋白elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Schleicheol 1 中文名： 分子式：C30H52O2
人preptinelisa试剂盒 人preptin试剂盒 规格型号：96T/48T 人preptin试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人preptin试剂盒、人preptin elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Sulfamonomethoxine 38006-08-5 中文名：磺胺间甲氧钠 分子式：C11H11N4NaO3S 度：98.0%
人Pirin蛋白(PIR)酶联吸附测定试剂盒 Human PIR (Pirin) ELISA Kit 2-Fluoroadenosine 146-78-1 中文名： 分子式：C10H12FN5O4
灭草烟,咪唑 Imazapyr acid 质量规格：>98% Rat soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit 大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒
咪唑(标准品) Imazapyr acid 质量规格：HPLC>99%,标准品 Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISAKit 人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
石胆酸(标准品) Lithocholic Acid 质量规格：>97(GC),标准品 Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISA试剂盒人抗丁型肝炎病毒抗体(ai-HDV)ELISA试剂盒规格：96T/48T
氧嗪酸钾 Potassium Oxonate 质量规格：>98% 植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量检测试剂盒20
氧嗪酸钾(标准品) Potassium Oxonate 质量规格：>98%,标准品 HumanVascuolarcelladhesionmolecule1，VCAM-1ELISAKit人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格：96T/48T
异丁司特 Ibudilast 质量规格：>98% 小鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒 ，英文名： MMP-5 ELISA Kit
异丁司特(标准品) Ibudilast 质量规格：HPLC>99%,标准品 大鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA检测试剂盒Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 96T/48T
吉西他滨 Gemcitabine 质量规格：>98%,free base 人0酸化微管相关蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)试剂盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit
沙利度胺（反应停） Thalidomide 质量规格：>98% RatThioredoxin,xELISAKit大鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISA试剂盒规格：96T/48T
沙利度胺(标准品) Thalidomide 质量规格：HPLC>98%,标准品 LAMBDA噬菌体DNA氯化铯化试剂盒10
PCR MasterMix细菌胱硫醚-γ-合成酶（cystathionine γ-synthase；CGS）活性荧光定量检测试剂盒
组织胱硫醚-γ-合成酶（cystathionine γ-synthase；CGS）活性荧光定量检测试剂盒
细胞胱硫醚-γ-合成酶（cystathionine γ-synthase；CGS）活性荧光定量检测试剂盒
植物胱硫醚-γ-合成酶（cystathionine γ-synthase；CGS）活性比色法定量检测试剂盒
真菌/酵母胱硫醚-γ-合成酶（cystathionine γ-synthase；CG
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
