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产品型号：500U|2500U
更新时间：2022-04-22
厂商性质：经销商
访问量：429
服务热线021-39596320
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下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
FastStar热启动DNA聚合酶 | HotStar DNA Polymerase | 500U|2500U | GOY-F10313 |
产品详细介绍：
HotStar DNA Polymerase是抗Taq酶单克隆抗体和WE0101 Taq DNA Polymerase的混合制品，适用于Hot Start PCR。使用Taq酶抗体进行PCR扩增时，高温变性前由于Taq酶抗体与Taq酶结合抑制DNA聚合酶活性，能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq酶抗体在PCR反应初的DNA变性步骤中变性，DNA聚合酶活性恢复，达到热启动效果。使用本品无需特殊地对Taq酶抗体失活处理，可以在常规PCR反应条件下使用。 ??HotStar DNA Polymerase具有5'→3'DNA聚合酶活性和5'→3'外切酶活性，无3'→5'外切酶活性，酶延伸速度2 kb/min，可以扩增长度达5 kb的片段。扩增得到的PCR产物3'端附有一个“A"碱基，因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点，主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。 注意： 1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度。 2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定。 3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。 储存条件：-20℃，避免反复冻融。 |
DNA提取流程图：
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
碱性蛋白酶测试盒 可见分光光度法 50管/24样 Tetracaine 中文名：盐酸丁卡因 分子式：C15H25ClN2O2
碱性成纤维生长因子 英文名称： basic fibroblast growth factor 规格： 48T/96T 英文缩写： b-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名：四乙基米氏酮 分子式：C21H28N2O
碱性0酸酶（AKP）检测 Acid phosphatase (ACP) detection Polypodine B 中文名：水龙骨甾酮B 分子式：C27H44O8
甲状腺球蛋白抗体 英文名称： Human Thyroglobulin Aibody 规格： 48T/96T 英文缩写： TGAb Pefloxacin mesylate 70458-95-6 中文名：甲磺酸培氟 分子式：C18H24FN3O6S
甲型流感H5N1 英文名称： Influenza A H5N1(Avian Flu) HA 规格： 48T/96T 英文缩写： H5N1 HA Prosapogenin A 19057-67-1 中文名：薯蓣次皂苷A 分子式：C39H62O12 度：% 关键词： 细胞毒活性; 麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
5(6)-ROX ;5(6)-羧基-X-罗丹明盐酸盐 5(6)-Carboxy-X- rhodamine; 5(6)-ROX 质量规格：>95%,进分 Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISA试剂盒人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
5-羟基-2-金刚烷酮 5-hydroxy-2-adamantanone 质量规格：>98.5% 植物内质网粗提分离试剂盒10
右佐 Es 质量规格：>99% Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit人垂草扁桃酸(VMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
右佐(标准品) Es 质量规格：>99%,标准品 小鼠肌侵蛋白(MTPN)ELISA试剂盒 ，英文名： MTPN ELISA Kit
醋酸曲安奈德 Triamcinolone Acetonide Acetate 质量规格：>97%,BR 人脂氧素A4(LXA4)ELISA检测试剂盒HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit 96T/48T
常山酮 Halofuginone 质量规格：提取含量5%以上 大鼠细胞分裂周期基因(CDC)试剂盒 Rat cell division cycle gene,CDC ELISA Kit
戈米辛D(标准品) Gomisin D 质量规格：＞98.0% (LC&T)，标准品 英文名称RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)ELISA试剂盒规格：96T/48T
1-甲基 1-Methyl Xanthine 质量规格：>98% 海洋动物(虾贝类)活性线粒体分离试剂盒10/50
6-羧基-X-罗丹明 6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX 质量规格：>95% ELISAKitFPB人血纤肽/纤维蛋白肽B规格：48T/96T
西仑吉肽 Cilengitide,EMD121974,NSC 707544 质量规格：>97%,integrin抑制剂 小鼠肌腱蛋白X(TNX)ELISA试剂盒 ，英文名： TNX ELISA Kit
FastStar热启动DNA聚合酶组织单胺氧化酶（MAO）总活性比色法定量检测试剂盒
细胞单胺氧化酶（MAO）总活性比色法定量检测试剂盒
体液氧化酶活性荧光定量检测试剂盒
组织氧化酶活性荧光定量检测试剂盒
细胞氧化酶活性荧光定量检测试剂盒
