用途：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本鸡肿瘤坏死因子α（TNF-α）elisa试剂盒实验方法的含量。

鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒实验方法     英文名称：Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit       检测方法：elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存，操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题，收货后十五个工作日内包退换。 
英文名称： Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit
规格：96T/48T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状：盒装液体
人白介素2受体（IL-2R)Elisa测定试剂盒用途：科研与实验试剂，不得用于临床诊断。
标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒实验方法实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒实验方法样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或 者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上 清。
5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒实验方法操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。
2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。 注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸*拍干。
7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。 9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 
注意事项：
1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商， 如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒实验方法安全性
1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

兔抗羊IgG（免疫血清）   0.5ml   支

SABC(小鼠/兔IgG)-POD kit    100-200T    盒

50×TAE 缓冲液  500ml   瓶

通用引物 ITS5 (10uM)    250ul   支

MRS肉汤 250g    瓶

L-Cysteine hydrochloride anhydrous L-盐酸半胱氨酸   25g 瓶

[I125] Human HDL I125放射性标记高密度脂蛋白 300uCi  瓶

SOD 超氧化物岐化酶(来源牛红细胞)    15KU    瓶

Linezolid 利奈唑酮  5g  瓶

Evans Blue 埃文斯蓝 1g  瓶

Hoechst 33342染色液(即用型) 10ml    瓶

Solar Fluor 555（效果同Alexa Fluor 555）    5 mg    支

两性电解质pH3-10 40%    12ml    瓶

Pig Bile salt 猪胆盐    25g 瓶

HPD600大孔吸附树脂  500g    瓶

8-苯胺-1-萘磺酸 8-Anili-naphthalenesulfonic acid-ANSA   25g 瓶

Syringaldehyde 丁香醛   5g  瓶

4-Aminobenzoic acid 对氨基苯甲酸    25g 瓶

PPO 2,5-二苯基噁唑  5g  瓶

称量纸 75mm×75mm   100张-包    包

(直径)13mm水系滤器  0.45um  个

5ml注射器 国产  1支 袋

L-Phenylalanine L-苯丙氨酸  63-91-2 200mg

Levodopa 左旋多巴   59-92-7 20mg

Epinephrine hydrochloride 盐酸肾上腺素  329-63-5    100mg

Methyl eugenol 甲基丁香酚   93-15-2 20mg

黑木耳多糖      20mg 6-（（2-（（4-（2，4-Dichlorophenyl）-5-（4-methyl-1H-imidazol-2-yl）pyrimidin-2-yl）amino）ethyl）amino）nicotinonitrile； CT99021 EZSolution CHIR99021， Sterile-Filtered

AdoMet SAM disulfate p-toluenesulfonate； SAMe  S-Adenosyl-L-methionine disulfate tosylate

Z-Val-Phe-CHO； Carbobenzoxy-valinyl-phenylalaninal； Calpain Inhibitor III MDL 28170

L-Threoascorbic acid， Antiscorbutic factor， Vitamin C L-Ascorbic acid

5-[2，4-Bis[（3S）-3-methyl-4-morpholinyl]pyrido[2，3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methoxybenzenemethanol    AZD8055

（2Z） -2-Cyano-N-（2，5-dibromophenyl）-3-hydroxy-2-butenamide LFM-A13

D-（    Chloramphenicol

3，5-Bis[（4-methylphenyl）methylene]-4-piperidone hydrochloride    DUB Inhibitor， NSC-632839

鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒实验方法Ethyl （3-methyl-6-（4-methyl-3-（methylsulfonamido）phenyl）-[1，2，4]triazolo[4，3-b]pyridazin-8-yl）carbamate    Bromosporine

β-Nicotinamide adenine dinucleotide， reduced form， （Reduced Coenzyme-I） disodium salt； β-DPNH， β-NADH， DPNH    NADH， disodium salt

T20 （PBS） Blocking Buffer EZBlock T20 （PBS） Blocking Buffer