用途：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本鸡乙酰乙酸检测（ACAC）elisa试剂盒实验方法的含量。

鸡乙酰乙酸检测(ACAC)elisa试剂盒实验方法     英文名称：Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA Kit       检测方法：elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存，操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题，收货后十五个工作日内包退换。 
英文名称：Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA Kit   
规格：96T/48T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状：盒装液体
人白介素2受体（IL-2R)Elisa测定试剂盒用途：科研与实验试剂，不得用于临床诊断。
标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
鸡乙酰乙酸检测(ACAC)elisa试剂盒实验方法实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
鸡乙酰乙酸检测(ACAC)elisa试剂盒实验方法样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或 者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上 清。
5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
鸡乙酰乙酸检测(ACAC)elisa试剂盒实验方法操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。
2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。 注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸*拍干。
7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。 9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 
注意事项：
1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商， 如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
鸡乙酰乙酸检测(ACAC)elisa试剂盒实验方法安全性
1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

75cm2正方斜口不透气培养瓶   5个 包

10%过硫酸铵 1ml 支

膜再生液    500ml   瓶

鸡IgG干粉  10mg    支

兔抗人IgG（免疫血清）   0.5ml   支

anti-GST Tag Rabbit Polyclonal antibody 100ul   瓶

Agarose 琼脂糖  10g 瓶

TaqMan One Step RT-qPCR Kit 200T    支

Bost aurusdomesticus 牛胆粉 100g    瓶

Uracil 尿嘧啶   25g 瓶

L-Glutathione reduced 还原型谷胱甘肽    10g 瓶

Pepsin 1:10000 胃蛋白酶1:10000  25g 瓶

Betamethasone 倍他米松  100mg   瓶

Coomassie brilliant blue G-250 考马斯亮蓝G-250  10g 瓶

醋酸洋红染色液  100ml   瓶

荧光素  1 g 支

N-acetyl-beta-d-glucosamine N-乙酰-D-氨基葡萄糖 25g 瓶

酸和盐     

ECH Sepharose 4B 羧基-琼脂糖凝胶 4B 25mL    瓶

TRIS    5kg 瓶

Trans-4-Hydroxycinnamic acid 反-对香豆酸    5g  瓶

Benzyltriethylammonium chloride 苄基三乙基氯化铵    100g    瓶

Mineraloil 矿物油(液体石蜡) 1000ml  瓶

包埋盒      个oxopentyl]amino]phenyl]amino]thioxomethyl]-4-（1，1-dimethylethyl）-benzamide； Tenovin-6

JWH 018 （solution） （10 mg）  （1-pentyl-1H-indol-3-yl）-1-naphthalenyl-methanone； AM678； JWH 018 （solution）

4-Methylbenzamide oxime （1 g） N-hydroxy-4-methyl-benzenecarboximidamide； p-Toylamideoxime； 4-Methylbenzamide oxime

Bisindolylmaleimide V （5 mg）  3，4-di-1H-indol-3-yl-1-methyl-1H-pyrrole-2，5-dione； Ro 31-6045|BIM V； Bisindolylmaleimide V

Geldanamycin （1 mg）   13R-hydroxy-8S，14S，19-trimethoxy-4，10，12S，16R-tetramethyl-3，20，22-trioxo-2-azabicyclo[16。3。1]docosa-1（21），4E，6E，10E，18-pentaen-9S-yl， carbamate； NSC 12275Geldanamycin

13，14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin F1α （100 ug）   9α，11α-dihydroxy-15-oxo-2，3，4，5-tetranor prostanoic acid； 13，14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin F1α

Aspalatone （5 mg） 2-（acetyloxy）-2-methyl-4-oxo-4H-pyran-3-yl-benzoic acid ester； Acetylsalicylic Acid Matol ester； Aspalatone

11β-Misoprostol （1 mg）   9-oxo-11。beta。，16-dihydroxy-16-methyl-prost-13E-en-1-oic acid， methyl ester； 11β-Misoprostol

Prostaglandin E2 （1 mg）   9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； Dinoprostone|PGE2； Prostaglandin E2

20-hydroxy Prostaglandin E2 （1 mg）    9-oxo-11α，15S，20-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 20-hydroxy PGE2； 20-hydroxy Prostaglandin E2

鸡乙酰乙酸检测(ACAC)elisa试剂盒实验方法 Prostaglandin F2α 1，11-lactone （5 mg）   9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid， 1，11-lactone； PGF2α 1，11-lactone； Prostaglandin F2α 1，11-lactone

15（R）-15-methyl Prostaglandin F2α （50 mg）  9。alpha。，11。alpha。，15R-trihydroxy-15-methyl-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15（R）-15-methyl PGF2α； 15（R）-15-methyl Prostaglandin F2α