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更新时间:2022-03-14
厂商性质:经销商
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产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)GR法测试盒 | 50管/48样 | GR法 | GOY-01S6452 |
商品介绍:
GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶,通常昆虫中GR被TrxR取代,是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一。GR催化NADPH还原GSSG生成GSH,有助于维持体内GSH/GSSG比值。GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用,此外GR还参与抗坏血酸-谷胱甘肽循环途径。
测定原理
GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH,同时不断消耗NADPH;通过测定NADPH减少量,即可测定GR活性。
实验中所需仪器及设备
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、移液器、1ml石英比色皿、双蒸水
测定操作表:
剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
天然蛋白 A1mg RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL
重组蛋白 A1mg RIPA 裂解液 ( 强 )100mL
重组蛋白 G1mg Rhodamine1235mg
重组蛋白 A/G1mg Rhod-2,三盐1mg
重组蛋白 L1mg Real-Time PCR 稀释液1mL
Nutlin-3(MDM2 拮抗剂 )1mg Actin-Tracker Green( 微丝绿色荧光探针 )0.2mL
Okadaic acid 钾盐 (PP1 和 PP2A 抑制剂 )10μg Actinomycin D( 基因转录抑制剂 )1mg
Paclitaxel(TAXOL)( )100μL Acridine Orange(AO)100mg
PD 98059(MAPKK 抑制剂 )2mg Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
PDTC(NF-κB 抑制剂 / 抗氧化剂 )1g Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL
大鼠Podocin蛋白(PDCN)elisa检测试剂盒
大鼠P物质 SP elisa检测试剂盒
大鼠P物质(SP)elisa分析检测试剂盒
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大鼠P物质受体(SP-R)elisa分析检测试剂盒
谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)GR法测试盒天净沙 SPIA 扩增试剂盒 ( 用于扩增 DNA 模板 )20 次 电泳级甘油100mL
T7 体外转录试剂盒50 次 电泳级二甲苯蓝 FF 溶液,1%10mL
SP6 体外转录试剂盒50 次 电泳级橙黄 G 溶液10mL
T3 体外转录试剂盒50 次 电泳级丙溶液 ( 干粉型 )200mL
m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD 电泳级 TEMED1.5mL