线粒体活性氧产生速率（ROS）荧光法测试盒公司各类热销产品鹿尿酸氧化酶elisa检测试剂盒
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商品介绍：
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，研究表明，机体95％以上的活性氧（ROS）都来自于线粒体，其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。

正常情况下，细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态，细胞内活性氧（ROS）水平维持在较低的生理范围；在病理情况下，细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破，细胞内活性氧水平过多，就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸，使机体出现氧化应激，同时，活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤，导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。

因此，通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。

测定原理：

荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜，在线粒体内被酯酶水解，形成无荧光的DCFH，DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合，线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。

需自备的仪器和用品：

多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。

产品名称：线粒体活性氧产生速率（ROS）荧光法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 荧光法
货号：GOY-01S6411
分类：氧化与抗氧化系列

试剂的组成和配制
提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入40mL试剂四充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂二：液体18μL×1瓶，4℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体50mL×1瓶， 4℃保存；
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表：

样本的前处理
①总FBP酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP，则按照步骤②提取粗酶液。
FBP活性计算：
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.1 mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！
非变性蛋白分子量标准25mg  Hydroxystilbamidine 10mg

蛋白质电泳分子量标准 (3.3-20.1KD)15 次  HRP 标记的兔抗 GST 标签多抗20μL

蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)20 次  HRP 标记的抗抗体10μL

蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0KD)10 次  His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL

预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次  Hemoglobin(NO 清除剂 )1g

Forskolin( 腺苷酸环化酶激活剂 )1mg  Catalase( 抗氧化酶 )200mg

Genistein( 蛋白激酶抑制剂 )25mg  Carboxy-PTIO( 清除剂 )5mg

Glucosamine( 胰岛素抵抗诱导剂 )5g  Carboxy-PTIO( 清除剂 )50mg

GSH( 抗氧化剂 )1g  Canavanine，sulfate(iNOS 抑制剂 )100mg

H-89.2HCL(PKA 抑制剂 )5mg  Camptothecin( 喜树碱 )100μL
大鼠α1抗前体(pre-α1-AT)elisa分析检测试剂盒

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大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa分析检测试剂盒

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线粒体活性氧产生速率（ROS）荧光法测试盒液体蛋白纯化回收试剂盒50 次  SDS-PAGE 上样液，5×1mL

石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒50 次  SDS-PAGE 上样液，5×10mL

昆虫细胞裂解液50mL  SDS-PAGE 浓缩胶配胶液500mL

植物总蛋白质微量提取试剂盒 (SDS-PAGE)30 次  SDS-PAGE 分离胶配胶液500mL

植物总蛋白质微量提取试剂 (2DE) 30 次  SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L