添加QQ号
3004901493
产品型号:
更新时间:2022-03-14
厂商性质:经销商
访问量:190
021-39596320
相关文章
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6356
分类:辅酶Ⅱ系列
商品介绍:
ICDHc(EC 1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸,同时还原NADP+生成NADPH。ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。
测定原理:
利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应,在340 nm下测定NADPH浓度的增加。
所需的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
腺苷单0酸活化蛋白激酶β2抗体 转录调节因子DACH2抗体
细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体 转录调节因子C/EBPγ抗体
0酸化蛋白激酶B2抗体 转录调节因子C/EBP β抗体
0酸化铁蛋白Fe65抗体 转录调节因子C/EBP α 抗体
发育分化增强因子1抗体 转录调节蛋白BACH2抗体
大鼠不对称二甲基精氨酸(ADMA)elisa分析检测试剂盒
大鼠不对称二甲基精氨酸(ADMA)elisa检测试剂盒
大鼠层连蛋白(Laminin)elisa检测试剂盒
大鼠层连蛋白/板层素(LN)elisa分析检测试剂盒
大鼠层连蛋白/板层素(LN)elisa检测试剂盒
胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法测试盒柱式酱油 DNAout10 次 液相内毒素清除剂500 次
溶壁酶干粉1g 液相内毒素清除剂100 次
蜗牛酶干粉5g 液相 RNase 清除剂1.5mL
消解酶 ( 溶细胞酶 ) 干粉100mg 液体蛋白纯化回收试剂盒50 次
真菌 DNAout50 次 液体 RNAout50 次
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。