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当前位置:首页产品中心生化试剂盒辅酶Ⅱ系列胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法测试盒

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法测试盒
产品简介:

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法测试盒公司各类热销产品FITC标记的锚蛋白重复结构域蛋白11抗体
FITC标记的细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体
FITC标记的粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体
FITC标记的肌侧索硬化症相关蛋白4抗体
FITC标记的天连接糖基化11抗体

产品型号:

更新时间:2022-03-14

厂商性质:经销商

访问量:190

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产品介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法测试盒
规格100/96
测试方法微量法
货号:GOY-01S6356
分类:辅酶Ⅱ系列
商品介绍:
ICDHc
EC 1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸,同时还原NADP+生成NADPHICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。

测定原理:

利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应,在340 nm下测定NADPH浓度的增加。

所需的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4保存;
测定步骤
1
分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2
将试剂一、二、三37(哺乳动物)25(其它物种)预热10分钟。
3
加样表:

图1.jpg

样本的前处理
FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定。
胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)1510的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4200g离心5min,弃沉淀,取上清在48000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤提取粗酶液。
腺苷单0酸活化蛋白激酶β2抗体     转录调节因子DACH2抗体

细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体     转录调节因子C/EBPγ抗体

0酸化蛋白激酶B2抗体     转录调节因子C/EBP β抗体

0酸化铁蛋白Fe65抗体     转录调节因子C/EBP α 抗体

发育分化增强因子1抗体     转录调节蛋白BACH2抗体
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胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)微量法测试盒柱式酱油 DNAout10   液相内毒素清除剂500

溶壁酶干粉1g  液相内毒素清除剂100

蜗牛酶干粉5g  液相 RNase 清除剂1.5mL

消解酶 ( 溶细胞酶 ) 干粉100mg  液体蛋白纯化回收试剂盒50

真菌 DNAout50   液体 RNAout50
FBP活性计算:
1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(W ×V÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反总:反应体系总体积,1×10-3 LεNADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.1 mLV样总:加入提取液体积,1mLT:反应时间,5 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g


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