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产品型号:
更新时间:2023-03-02
厂商性质:经销商
访问量:172
021-39596320
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D03 |
产品名称:高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白人
英文名称:Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)
HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1
型号:GOY-01D03
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌, 细胞质
预测分子量:47.2kDa
实际分子量:47kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Gly204~Leu364 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.6
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相关产品:
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
芳基酯酶B抗体 ARSB
腺苷A1A受体抗体 ADORA1
γ氨基丁酸转氨酶抗体 ABAT
共济失调蛋白2结合蛋白1抗体 A2BP1
肿瘤坏死因子α转换酶 ADAM17
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ABI基因家族成员3结合蛋白抗体 ABI3BP
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乙醛脱氢酶1蛋白家族L1抗体 ALDH1L1
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爪哇根霉 Rhizopus javanicus纳豆芽胞杆菌 Bacillus natto
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克鲁斯假丝酵母 Candida krusei酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
BGC-803(人胃细胞)糙皮侧耳 Pleurotus ostreatus
玫瑰产色链霉菌 Streptomyces roseochromogenes褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
无花果曲霉 Aspergillus ficuum爪哇根霉 Rhizopus javanicus
根瘤菌费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii
BRL 3A, 大鼠肝正常细胞大鼠大隐静脉内皮细胞培养基
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiU251人胶质瘤细胞
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis毛霉属 Mucor sp.
黄芪黄酮费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii
爪哇根霉无花果曲霉变种 Aspergillus ficuum var.