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英文名称：Recombinant Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)  产品名称：磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

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英文名称：Recombinant Thymidine Phosphorylase (TP)  产品名称：胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

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产品属性：

产品名称：基质金属蛋白酶7(MMP7)重组蛋白牛

英文名称：Recombinant Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)

MPSL1; MAT; PUMP-1; Matrilysin Uterine; Matrilysin; Matrin; Pump-1 Protease; Uterine Metalloproteinase

型号：GOY-01D70

酶与激酶

肿瘤免疫

物种：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌, 细胞外基质

预测分子量：57.0kDa

实际分子量：57kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Asp29~Lys267 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：9.0

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

铁调节蛋白2抗体 Aconitase 2

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芳香胺N-乙酰化转移酶抗体 AANAT

腺苷酸环化酶4抗体 ADCY4

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中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii亮白曲霉 Aspergillus candidus

SF9, 昆虫卵巢细胞人胚肾细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae浑浊红球菌 Rhodococcus opacus

10%SDS溶液豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae赭鲑色正青霉 Eupenicillium ochrosalmoneum

香菇 Lentinula edodes黑曲霉 Aspergillus niger

正常人结肠组织细胞苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis

RH-35(大鼠肝细胞)酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小肠结肠炎耶尔森氏菌 Yersinia enterocolitica香菇 Lentinula edodes

NCI-H520(人肺鳞细胞)多粘类芽胞杆菌 Paenibacillus polymyxa