丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重组蛋白人公司正在出售的产品：人毛状样蛋白(Coactosin-like protein)ELISA试剂盒96T 0.156-10 ng/mL人糖类抗原50（Carbohydrate Antigen 50）ELISA试剂盒96T 3.12-200 ng/mL人生长调节致癌基因α/黑素瘤生长刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒96T 78

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

产品名称：丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重组蛋白人

英文名称：Recombinant Pyruvate kinase isozymes R/L (PKLR)

PK; PyK; PK1; PKL; Pyruvate Kinase Isozymes R/L; Glutamic--pyruvic transaminase 1; R-type/L-type pyruvate kinase; Red cell/liver pyruvate kinase

型号：GOY-01D131

酶与激酶

代谢通路

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：n/a

预测分子量：25.2kDa

实际分子量：28kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ile219~Met420 (Accession # P30613) with

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：6.1

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

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操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

9号染色体开放阅读框64抗体 C9orf64

9号染色体开放阅读框62抗体 C9orf62

9号染色体开放阅读框66抗体 C9orf66

9号染色体开放阅读框68抗体 C9orf68

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猫肾上皮细胞CA46(人Burkitts淋巴瘤细胞)

汉逊德巴利酵母 Enterobacter cloacea酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis

根瘤菌 Rhizobium sp.酒假丝酵母 Candida kefyr

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum金耳 Tremella aurantialba

肝细胞HBV病毒株枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis

毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes异常汉逊酵母 Hansenula anomala

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaBCIP/NBT KitBCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒

屎肠球菌 Enterococcus faeciumGC-1, 鼠原细胞

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暗黑橄榄链霉菌 Streptomyces atroolivaceus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠角膜内皮细胞培养基百脉根根瘤菌 Rhizobium loti