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更新时间:2025-08-02
厂商性质:经销商
访问量:515
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蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
蛋白激酶Cη(PKCh)重组蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D146 |
产品名称:蛋白激酶Cη(PKCh)重组蛋白人
英文名称:Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
PRKCH; PRKC-H; PKC-L; PRKCL; NPKC-Eta
型号:GOY-01D146
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞质
预测分子量:30.9kDa
实际分子量:30kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Phe355~Phe614 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:5.6
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相关产品:
英文名称:Recombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD) 产品名称:尿黑酸1,2-双加氧酶(HGD)重组蛋白物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD) 产品名称:4-羟基酸双加氧酶(HPD)重组蛋白物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1) 产品名称:-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Ha1)重组蛋白物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名称:Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide II (P4Ha2) 产品名称:脯氨酰4-羟化酶α多肽Ⅱ(P4Ha2)重组蛋白物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide III (P4Ha3) 产品名称:脯氨酰4-羟化酶α多肽Ⅲ(P4Ha3)重组蛋白物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Muscle, Skeletal, Receptor Tyrosine Kinase (MUSK) 产品名称:骨骼肌特异性受体激酶(MUSK)重组蛋白物种:Homo sapiens (Human,人)
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
细胞连接相关蛋白1抗体 CLASP1
冷诱导RNA结合蛋白抗体 CIRBP
细胞连接相关蛋白2抗体 CLASP2
磷酸化周期素依赖性激酶5抗体 phospho-CDK5(Tyr15)
异戊烯半羧基甲基转移酶抗体 ICMT
核苷酸交换因子CLLD7抗体 CLLD7
趋化素样因子超家族成员4抗体 CKLFH4
趋化素样因子超家族成员7抗体 CKLFSF7
卷曲螺旋结构域蛋白64B抗体 CCDC64B
组蛋白H3-K9甲基转移酶抗体 CLLD8
趋化素样因子超家族成员5抗体 CKLFH5
趋化素样因子超家族成员6抗体 CKLFH6
蛋白激酶Cη(PKCh)重组蛋白人A172(人脑胶质瘤细胞)B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)
植物杆菌 Lactobacillus plantarum根瘤菌
疣孢漆斑菌 Myrothecium verrucaria大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
MA, 小鼠星形胶质细胞非洲绿猴肾细胞
黑曲霉 Aspergillus nigerPLC/PRF/5(人肝亚力山大细胞)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物杆菌 Lactobacillus plantarum
不产色链霉菌 Streptomyces achromogenes黑曲霉 Aspergillus niger
日本根霉 Rhizopus japonicus多孢木霉
易脆毛霉 Mucor fragilis弯曲假单胞菌 Pseudomonas flectens
大鼠神经胶质细胞培养基小鼠黑色素瘤细胞
宇佐美曲霉 Aspergillus usamiiMM, 小鼠小胶质细胞
泡盛曲霉 Aspergillus awamori大鼠卵巢成纤维细胞培养基
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. Lactis