高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白(大肠杆菌公司正在出售的产品：凋亡加强结构域蛋白6抗体 英文名称：CARD6 0.2ml凋亡加强结构域蛋白17抗体 英文名称：CARD17 0.2ml4号染色体开放阅读框34抗体 英文名称：C4orf34  0.2ml

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)

HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1

型号：GOY-01D2053

酶与激酶

物种：Escherichia coli(大肠杆菌)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：15.4kDa

实际分子量：16kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ala10~Gly146 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：5.7

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

基质金属9(MMP9)重组蛋白英文名称：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物种：Horse，马

基质金属3(MMP3)真核蛋白英文名称：Eukaryotic Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1物种：Human，人

蛋白激酶Cζ(PKCz)重组蛋白英文名称：Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz)PKC2; PKC-Z; PRKCZ; Protein Kinase M Zeta物种：Rat，大鼠

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

人腺细胞英文名称：MCF-7

醋林 质量规格：纯度大于98% Triptorelin Acetate

 大鼠胰岛素细胞英文名称：INS-1

盐万古 质量规格：≥900μg/mg,USP33,BR Vancomycin HCl

 牛奶蛋白胨/蛋白胨C/Peptonized milkBR100/500克国产/进口

凡德他尼 质量规格：>99%,可用于细胞培养 Vandetanib

 伊红美兰平板/EMB Agar Plate10块国产/进口

盐万古(标准品) 质量规格：含量测定 Vancomycin HCl

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酒石伐伦克林 质量规格：>98% Varenicline Tartrate

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酒石伐伦克林(标准品) 质量规格：HPLC≥98%,标准品 Varenicline Tartrate

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酒石长春瑞宾/重酒石长春瑞宾 质量规格：>98%,USP,BR Vinorelbine Tartrate

 大鼠关节软骨细胞培养基100mL

重酒石长春瑞宾(标准品) 质量规格：HPLC≥98%,标准品 Vinorelbine Tartrate

高温需求因子A1(HTRA1)重组蛋白(大肠杆菌大鼠凋亡相关因子配体(FASL)免疫试剂盒进口、分装

2 ug pOPI3CAT pOPI3CAT 低温运输，-20℃保存

马黄体生成素(LH)免疫试剂盒现货供应

2 ug pCMV-Flag-N pCMV-Flag-N 低温运输，-20℃保存

大鼠钙网蛋白(CRT)免疫试剂盒进口、组装

胰酪大豆胨液体培养基（TSB）  250ml*20瓶

猪白介素6(IL-6)免疫试剂盒进口、组装

2 ug pNEBRX1-hygro pNEBRX1-hygro 低温运输，-20℃保存

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