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基质金属蛋白酶9(MMP9)活性蛋白小鼠
产品简介:

基质金属蛋白酶9(MMP9)活性蛋白小鼠公司正在出售的产品:G蛋白偶联受体120抗体,英文名称:GPR120 0.2ml;G蛋白偶联受体40抗体,英文名称:GPR40 0.2ml;促性腺素释放激素受体2抗体,英文名称:GNRHR2 0.1ml。

产品型号:

更新时间:2025-04-08

厂商性质:经销商

访问量:268

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产品介绍

蛋白表达及纯化:

1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。

3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。

产品属性:

产品名称

物种

货号

基质金属蛋白酶9(MMP9)活性蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D3088

英文名称:Active Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase

型号:GOY-01D3088

物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)

缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性状:冻干粉

纯度:> 90%

等电点:-

应用:Cellculture;ActivityAssays.

规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg

基质金属蛋白酶9(MMP9)活性蛋白小鼠
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操作步骤:

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1、在每1mL冷Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂,1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

2、每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;

3、取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5min;

4、取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5、分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1、贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;

2、悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中,1000转/分离心10min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5min洗两次;

3、在每1mL冷Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂,1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

4、细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

细胞数量

Lysis Buffer加入量

107个

0.5mL~1mL

5×106个

0.2mL~0.5mL

5、置于4℃摇床平台上,温和振荡15min;

6、14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7、分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品:

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