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更新时间：2023-03-27
厂商性质：经销商
访问量：156
服务热线021-39596320
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免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
商品属性：
产品名称 | 规格 | 产品分类 | 抗体来源 |
信号转导接头蛋白2抗体 | 50ul、100ul、200ul | 抗体 / 一抗 | Rabbit |
规格 50ul 100ul 200ul
产品分类 抗体 / 一抗
英文名称 ：STAP2
英文别名 ：BKS; Breast tumor kinase substrate; BRK substrate; Signal transducing adaptor protein 2; Signal-transducing adaptor protein 2; Ssignal transducing adaptor family member 2; STAP 2; STAP-2; STAP2; STAP2_HUMAN.
交叉反应 ：Human
标记 ：Unconjugated
抗体来源：Rabbit
抗体类型：Polyclonal
免疫原：KLH conjugated synthetic peptide derived from human STAP2
蛋白细胞定位：细胞浆
纯化方法：affinity purified by Protein A
亚型：IgG
性状：Liquid
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景资料 ：
Protein kinases comprise a large group of encoded factors that regulate cellular processes by catalyzing the transfer of a phosphate group to a hydroxyl acceptor in serine, threonine or tyrosine residues (1,2). Kinases are capable of influencing the oncoic potential of cell sytems at the level of oncoprotein or tumor suppressor protein phosphorylation states (1,2). STAP-2 is a protein that contains a pleckstrin homology (PH) domain and an SH2 domain, and associates with BRK (3). BRK (breast tumor kinase, Sik) is a 451 amino acid, nonreceptor protein-tyrosine kinase that is overexpressed in breast tumors and metastatic melanoma cell lines (4). Similar to the Src family of intracellular kinses, BRK is comprised of an SH3 domain, an SH2 domain, and a catalytic domain (5). STAP-2 is susceptiple to tyrosine phosphorylation and may be invovled in tyrosine kinase-mediated signaling cascades, whose aberrant function may lead to metastis (3). |
抗体制备过程：
1.材料与试剂
a．提取的动物 Ig
b．弗氏佐剂和弗氏不佐剂
d．实验动物 兔
e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）
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抗体分子标记技术：
（一）原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为残基,残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
（二）准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；
（三）操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；
2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；
6.碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
下列是公司正销售的产品：
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