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锌指蛋白75抗体
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更新时间:2023-03-28

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产品介绍

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抗体来源

锌指蛋白75抗体

50ul、100ul、200ul

抗体 / 一抗

Rabbit

 

规格 50ul 100ul 200ul

产品分类 抗体 / 一抗

英文名称 ZNF75

英文别名  D8C6; MGC126327; OTTHUMP00000024073; RP13 210D15.7; Zinc finger protein 75; Zinc finger protein 75D; Zinc finger protein 82; Zinc finger protein 82; ZN75D_HUMAN; ZNF75D; ZNF82.

交叉反应  Human

标记  Unconjugated

抗体来源  Rabbit

抗体类型  Polyclonal

免疫原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNF75

蛋白细胞定位  细胞核

纯化方法  affinity purified by Protein A

亚型  IgG

性状  Liquid

浓度  1mg/ml

储存液  0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件  Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

背景资料

 Zinc finger protein 75 (ZNF75), also known as ZNF82, is a 289 amino acid member of the Krüppel C2H2-type zinc finger protein family. Localized to the nucleus, ZNF75 contains five C2H2-type zinc fingers and one KRAB domain through which it is thought to be involved in DNA-binding and transcriptional regulation.

 

抗体制备过程:

1.材料与试剂

a.提取的动物 Ig

b.弗氏佐剂和弗氏不佐剂

d.实验动物 兔

e.其它材料及试剂

2、选择实验活体。

3、进行动物免疫实验。

4、试取血样进行测试,查看免疫效果。

5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。

6、纯化出抗体。

7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)

2.png

免疫荧光技术的实验步骤:

一、准备好试剂与仪器:

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

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抗体分子标记技术:

(一)原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为残基,残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

(二)准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;

(三)操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;

2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;

6.碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

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