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更新时间:2023-04-04
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中文名称 | 黑色素瘤相关抗原D4抗体 |
英文名称 | MAGD4 |
规格 | 50ul 100ul 200ul |
产品分类 | 抗体 / 一抗 |
英文别名 Melanoma-associated antigen D4.
英文别名 Human, Cow
标记 Unconjugated
抗体来源 Rabbit
抗体类型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MAGD4
蛋白细胞定位 细胞膜
纯化方法 affinity purified by Protein A
亚型 IgG
性状 Liquid
浓度 1mg/ml
储存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景资料 This gene is a member of the MAGED gene family. It is expressed only in brain and ovary, and some transcript variants of this gene are specifically expressed in glioma cells. This gene is clustered with other MAGED genes on chromosome Xp11. Alternatively spliced transcript variants encoding different isoforms have been described for this gene. [provided by RefSeq, May 2011]
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备 | 2. 免疫动物 | 4. 免疫血清 |
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。 | 常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。 3. 免疫血清的收集 一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。 | 纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化 ,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有 高效,特异性强,纯度高的特定。接着要 鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、 纯度以及特异性。5. 免疫血清的保存建 议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。 |
抗体作用:
1、中和毒素和阻止病原体入侵,抗体在体外可发生各种抗原、抗体结合反应,有利于抗原或抗体检测、功能判断,在体内可中合毒素、阻断病原体入侵、清除病原微生物。
2、激活补体产生攻膜复合物,使细胞溶解破坏,抗体与相应抗原结合后,可通过经典途径激活补体系统,产生多种效应功能。
3、调理吞噬和抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用,调理作用是指IgG抗体的FC段与中性粒细胞、巨噬细胞表面下段FC受体结合,从而增强吞噬细胞的吞噬作用。抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用是指具有杀伤活性的细胞,如NK细胞,通过其表面的FC受体,识别包被于靶细胞表面抗原上的抗体FC段,直接杀伤靶细胞。
4、介导Ⅰ型超敏反应。
5、穿过胎盘屏障和黏膜,IgG是能够通过胎盘的抗体,对于新生儿的抗感染具有重要意义。
6、分泌型的IgA可通过呼吸道和消化道黏膜,在黏膜局部免疫中发挥重要的免疫防御作用。
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
优势:
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一抗和二坑的区别:
第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。
第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。
一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。
一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。
二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
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