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锁阳LAMP鉴定试剂盒的反应条件
锁阳LAMP鉴定试剂盒的反应条件:因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。◇循环次数根据模板DNA的量以及扩增片段的大小,设定25~30个循环。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,则会出现Smear。◇Anneal以及Extension合适的Anneal温度通常在45~68℃之间(预备实验可2℃间隔进行)。另外,由于在60~68℃间,也有很高的活性,因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度,进行2StepPCR。Anneal-Ex...
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败血梭状芽胞杆菌PCR检测试剂盒注意事项
败血梭状芽胞杆菌PCR检测试剂盒注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一...
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副结核分支杆菌PCR检测试剂盒反应五要素
副结核分支杆菌PCR检测试剂盒反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基:G+...
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巨噬细胞来源的趋化因子检测试剂盒实验注意事项
巨噬细胞来源的趋化因子检测试剂盒实验注意事项:1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。4、...
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四角瑞氏绦虫PCR检测试剂盒实验注意事项
四角瑞氏绦虫PCR检测试剂盒实验注意事项:1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。实时荧光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*...
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番鸭细小病毒PCR检测试剂盒实验操作洗板方法
番鸭细小病毒PCR检测试剂盒实验操作洗板方法:1.手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。2.自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。说明1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。2.浓洗涤液会有盐析...
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同詹姆士城峡谷病毒PCR检测试剂盒实验步骤
同詹姆士城峡谷病毒PCR检测试剂盒实验步骤:①产品仅用于科研取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。②两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀将水相上层转移到一干净无RN...
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乳酸乳球菌PCR检测试剂盒实验流程
乳酸乳球菌PCR检测试剂盒实验流程:1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。3.每次实验应该设置阴、阳性对照。4.试剂盒所有试剂在使用前应该...
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小鼠肝炎病毒PCR检测试剂盒试剂的准备
小鼠肝炎病毒PCR检测试剂盒试剂的准备:1.DNA模板2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)3.10×PCRBuffer4.2mMdNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM5.Taq酶操作步骤1.在冰浴中,按以下次序将各...
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小鼠甲状腺球蛋白(TG)elisa试剂盒操作步骤
小鼠甲状腺球蛋白(TG)elisa试剂盒操作步骤:1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液...
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跳跃病病毒PCR检测试剂盒注意事项
跳跃病病毒PCR检测试剂盒注意事项:①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。②使用干净的塑料容器配置洗涤液。③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分...
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芝麻PCR检测试剂盒实验操作步骤
芝麻PCR检测试剂盒实验操作步骤:1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。10×PCRbuffer5μldNTPmixl4μl引物1(10pM)2μl引物2(10PM)2μlTaq酶(2U/μl)1μlDNA模板(50ng-1μg/μl)1μl加ddH2O至50μl视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃40s→58℃30s→72...
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