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肿瘤细胞表面染色

更新时间:2018-02-24点击次数:845

收集各组肿瘤细胞,进行细胞计数,加入适量 Wash Buffer 液洗涤,1500 rpm 离心 5 min,去上清,加入 50 μl Wash Buffer 重悬。

(可选)Live dead 染色,每管加 0.1 μL Zombie GreenTM Dye(样品多时使用时可先稀释),震荡混匀,室温避光孵育 10~15 min。Wash Buffer 液洗涤,1 500 rpm 离心 5 min,弃上清。

封闭 Fc 受体:每管中加入 1 μg/106 细胞 Anti-Mouse CD16/CD32 抗体封闭荧光抗体 Fc 受体引起的非特异性染色。震荡混匀,4℃ 孵育 30 min(或室温避光 15 min)。Wash Buffer 液洗涤,1 500 rpm,离心 5 min,弃上清。

用适量体积 Wash Buffer 液重悬每个样本,将各组细胞等细胞数混合后分装到单染管和不染抗体管,作为流式检测时调节电压。

单染管中加入相应表面染色抗体,同时在每个样本中加入 1 μL percp CD3/106 细胞和 0.5 μL PE CD4/106 细胞,震荡混匀,4℃ 避光孵育 30 min(或室温避光 15 min)。

用 Wash Buffer 液洗涤,1500 rpm 离心 5 min,弃上清。

肿瘤细胞打孔或者加入 200 μL 1% PFA(多聚甲醛)固定过夜。
61336-70-7    Amoxicillin    阿莫西林标准品    200mg
69-53-4    Ampicillin    氨苄青霉素标准品    200mg
7177-48-2    Ampicillin Trihydrate    氨苄青霉素三水酸标准品    200mg
121-25-5    Amprolium    安普罗铵标准品    200mg
120511-73-1    Anastrozole    阿那曲唑标准品    200mg
    Anecortave Acetate    醋酸阿奈可他标准品    200mg
154-68-7    Antazoline Phosphate    磷酸安他唑啉标准品    200mg
1143-38-0    Anthralin    地蒽酚标准品    200mg
60-80-0    Antipyrine    安替比林标准品    200mg
88495-63-0    Artesunate    青蒿琥酯标准品    200mg
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