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结合态淀粉合成酶(GBSS)​操作流程描叙

更新时间:2021-08-31点击次数:433

结合态淀粉合成酶(GBSS)操作流程描叙:

         1、将要进行实验的版孔进行设定好,标准品 5 个点,每个点设定平行,需要用到 10 个孔,空白只需 1 个孔。剩下孔可以做为样本孔

         2、 稀释标准,准备好 5 个 EP 管,然后在每个 EP 管中加入 150 微升标准稀释液,编上编码,分别为 1,2,3,4,5,在 1 号管中加入 150 标准品,用枪头反复吹打 10 次左右(注意控制幅度不要过大容易产生气泡)如果有涡旋仪可以在涡旋仪上涡旋 5 秒左右,然后换枪头,在 1 号管中取 150 微升加入到 2 号管,后面过程一次类推。最后稀释完,前面 4 个管中每管液体在 150 微升,5 号管为 300 微升。浓度是从大到小。

         3、 标准、样本、空白加样:标准是每个浓度点 2 个孔(做平行),每孔加入 50 微升,加样过程中注意换枪头,样本孔中每孔加入 50 微升,加样过程中注意换枪头,空白孔加入 50 微升标准稀释液或者样本稀释液。特别要说明的是,标准加样和样本加样尽量控制在 15 分钟内加完,如果时间拖的太长,会导致前面孔先反应后面孔才开始反应,这样数值偏差过大。加完样后盖上封板膜,至 37 摄氏度孵育 30 分钟.

        4、洗版,在孵育过程中可以将洗涤液配好,20 ml30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或者去离子水定容到 600 ml 即可。每孔加入 250-300 微升的洗涤液(不要漫过版孔),(如果有震荡仪的话,可以讲板子放入震荡仪上 5 秒左右,然后静止三十秒,没有请忽略次过程)将板子在桌子上晃动 5 秒左右,然后静置 30 秒,甩干,拍板。说明:甩干过程尽量要快,1 秒内就可以完成,不要慢慢倾斜倒掉液体,直接翻板甩掉液体即可。拍板过程需要在桌子上垫一层吸水纸或者滤纸,版孔朝下拍几下,拍干区别主要看吸水纸和滤纸上没有明显的水渍为完成。

         5、每孔加入 50 微升的酶标试剂,此处在空白孔中不需要加(空白孔为空),孵育 30 分钟。

         6、  洗版同步骤 4

         7、显色,先每孔中加入 50 微升的显色 A 液,然后每孔中加入 50  微升显色  B  液。避光 37 摄氏度显色 15 分钟

         8、终止,每孔加入 50 微升的终止液,注意,加完终止液必须在 15  分钟内读数,超过时间读数无效。在规定时间内读数都是有效的。

         9、至此,整个实验结束。

嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员12(EAR12)ELISA试剂盒

嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)ELISA试剂盒

嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒

嗜环蛋白/亲环素B(CyPB)ELISA试剂盒

嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒

嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒

嗜肺军团菌抗原(LP Ag)ELISA试剂盒

视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒

视黄酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)ELISA试剂盒

视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒

视黄醇结合蛋白4(RBP4)ELISA试剂盒

视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒

食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒

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生长抑素(SS)ELISA试剂盒

生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒

生长调节致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA试剂盒

生长调节致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA试剂盒

生长调节致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒

生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒


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