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ATCC细胞电融合方法

更新时间:2018-04-18点击次数:352

1、仪2S结构和使用方法
JCF-型ATCC细胞电融事仪的各项技术参数是通过大量的融合实验数据,并参考岛津公司(日)SSH型电融合装置的参数值而设计的.当打开电源,指示灯亮,并拨通输出开关和正弦输出开关,选择和按下正弦频率按键(共分为0.6、0.8、1.3、1.5MHz五档),此时将输出电缆与示波器相接,在示波器上即出现高频正弦波形,当左右旋转正弦幅度旋钮,则正弦电压的p-p值,也随之降低和升高,如果将输出电缆与电融合室相接,则细胸相互连接.此时再旋动正弦幅度(即正弦电压)旋扭,则仪器上电压表指针随之升高和降低.如果正弦电压过高,则细胞连接速度加快,并呈串珠状,不利于两细胞融合。
将正弦输出开关搬至“复合输出”档,根据所需功率大小选拔复合输出I或、II档、I档为低功率,II档为高功率;再根据实验要求,选择并按下你所需要的“脉冲宽度”拨键(分1ms,0.2ms、0.1ms、10ms、1us五档)和“脉冲幅度”按键(50V、100V、150V、200V、250V五档),还配有脉冲幅度旋扭(细调),调整范围0-50V,可使每档增值50V。
施加脉冲刺激可分为“自控”和“手控”两档,当使用“自控”输出脉冲时,先将开关搬向自控档,然后根据需要选择并按下“脉冲频率按健”(分为2sl次及每秒1次、2次、5次、l0次共五档),即可自动发送电脉冲;如果将开关搬至“手控”档,需按动“手控”按扭,每按动一次发送一个脉冲。无论自控或手控输出,每个脉冲输出都伴有报鸣音响,将输出端与脉冲示波器连接,则可观察到由脉冲宽度、幅度及脉冲间隔所构成的示波图像,当改变以上有关参数值时,其图像亦发生变化:把开关搬向反向,则产生负脉冲,当脉宽和幅度等值不变时,其图像与正脉冲波形相同,但方面相反,上下对称.将电缆输出端与电融合室的两电极相接,并按上述要求发送一定方波脉冲,细胞受到电刺激后,可产生融合。
2、ATCC细胞电融合操作
植物原生质体融合
开启电源,关闭“输出开关”,将开关搬向正弦输出档,此时可根据实验需要,将正弦额度选择在1—1.3MHz,脉冲宽度为0.1ms或)10μs,脉冲幅度为150V,脉冲频率为1次/s,并依次按下各标定按键,zui后调整正弦电压(即正弦幅度)旋扭,使电压表处于5-10V处。 
Tetracaine Hydrochloride    200mg    盐酸丁卡因标准品    136-47-0 
Tetracycline Hydrochloride     200mg    盐酸四环素标准品    64-75-5 
Tetrahydrozoline Hydrochloride     200mg    盐酸四氢唑啉标准品    522-48-5 
Thalidomide     200mg    沙利度胺标准品    50-35-1 
Thiabendazole    100mg    噻苯咪唑标准品    148-79-8 
Thiamylal CIII DISCONTINUED    200mg    硫戊比妥标准品    
Thiethylperazine Malate    200mg    苹果酸硫乙拉嗪标准品    52239-63-1 
Thiethylperazine Maleate     200mg    马来酸乙巯拉嗪标准品    1179-69-7 
Thimerosal     500mg    硫柳汞钠标准品    54-64-8 
Thioguanine    200mg    硫鸟嘌呤标准品    154-42-7 
ATCC细胞

 

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