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干细胞鉴定法之成骨诱导分化

更新时间:2017-10-27点击次数:161

干细胞鉴定法之成骨诱导分化
茜素红染色方法和原理:茜素红又名茜素磺酸钠,茜素S,茜素红S,茜素胭脂红,1,2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠,1,2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠盐。橙黄色或黄棕色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于苯。1%水溶液pH 为2.15,其水溶液呈浅黄褐色,加盐酸后变成黄色,加氢氧化钠后则变成蓝紫色。有刺激性。能与许多金属离子生成带色化合物,能与锆、钍、铝、钛及铍和钙的显色反应。染色的原理就是茜素红和钙发生显色反应,产生一种深红色的带色化合物,这样成骨诱导的细胞外面沉积的钙结节也就被染成了深红色。

成骨诱导的过程是使钙离子能够以钙盐的方式沉淀下来,这就是我们常说的“钙结节”。鉴定钙结节的染色方法常用“茜素红”。

步骤:
(1)吸去诱导液,再PBS 洗一到两次;
(2)加入10%中性甲醛,固定30min-60min;
(3)吸去固定液,加入0.1%的茜素红染色液,染色6-10min;
(4)用PBS 洗两次,去处残留的染色液;
(5)干细胞加入PBS,完成染色。
500G    十八水硫酸铝        ALUMINUM SULFATE OCTADECAHYDRATE        KIT        7411-49-6
4L    鞘液,无防腐剂,8X        SHEATH SOLUTION, PRESERV-FREE, 8X        64285-73-0
4L    鞘液,含防腐剂,8X        SHEATH SOLUTION WITH PRESERV, 8X        
5kg                               尿素        UREA        
100 KG    磷酸钠        SODIUM PHOSPHATE MONO DIHYDRAT        64285-73-0
12KG    磷酸钠        SODIUM PHOSPHATE MONO DIHYDRAT        533-67-5
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