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人永生化表皮细胞；HaCaT图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人永生化表皮细胞；HaCaT图片
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤，角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  15%FBS
传代方法  1:10～1:20传代，每周换液2～3次
传代情况 C2
冻存条件  基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：9，11；D13S317：10，12；D16S539：9，12；D18S51：12；D19S433：13，14；D21S11：30.2；D2S1338：17，25；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：9，11；D8S1179：14；FGA：24；TH01：9.3；TPOX：11，12；vWA：16，17，OL；
同工酶 
染色体  72～88
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌 )    96 支
10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌带芯 )    96 支
10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌带芯长尖 )    96 支
10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌长尖 )    96 支
10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装长尖 )    96 支
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装 )    1000 支
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装带芯 )    1000 支
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 盒装 )    100 支
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 盒装已灭菌 )    100 支
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 盒装已灭菌带芯 )    100 支
10nt 随机引物，0.5μg/μL    5μg
1400W(iNOS 抑制剂 )    2mg
15mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)    1个
15mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)    1个
15mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)    1个
15mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)    1个
1A75 枯草宿主菌菌种    1mL
1μL 超微量分光光度计    1个
2-( 环己胺基 ) 乙烷磺酸    5g
2-(N- 吗啉 ) 乙磺酸    10g
2,3,5 氯化三苯基四氮唑    1g25-hydroxy Vitamin D2 （1 mg）4-methylene-3-[（2E）-2-[（1R，3aS，7aR）-octahydro-1-[（1R，2E，4S）-5-hydroxy-1，4，5-trimethyl-2-hexenyl]-7a-methyl-4H-inden-4-ylidene]ethylidene]-cyclohexanol； Ercalcidiol|25-Hydroxyergocalciferol； 25-hydroxy Vitamin D2
2-Pyridylamide oxime （500 mg）N-hydroxy-2-pyridinecarboximidamide； Picolinic Acid Amidoxime； 2-Pyridylamide oxime
1a，1b-dihomo Prostaglandin E1 （5 mg）9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-1a，1b-dihomo-prost-13E-en-1-oic acid； 1a，1b-dihomo PGE1； 1a，1b-dihomo Prostaglandin E1
13，14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin D2 （10 ug）9α-hydroxy-11，15-dioxo-2，3，4，5-tetranor-prostanoic acid； 13，14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin D2
Chaetocin （1 mg）2，2’，3S，3’S，5aR，5’aR，6，6’-octahydro-3，3’-bis（hydroxymethyl）-2，2’-dimethyl-[10bR，10’bR（11aS，11’aS）-bi-3，11a-epidithio-11aH-pyrazi’，2’:1，5]pyrrolo[2，3-b]indole]-1，1’，4，4’-tetrone； Chaetocin
PP2 （5 mg）3-（4-chlorophenyl）-1-（1，1-dimethylethyl）-1H-pyrazolo[3，4-d]pyrimidin-4-amine； AGL 1879； PP2
3-Methyladenine （25 mg）3-methyl-3H-purin-6-amine； NSC 66389|3-MA； 3-Methyladenine
CB-86 （50 mg）N-cyclopropyl-8-[3-（1，1-dimethylheptyl）-5-hydroxyphenoxy]-oct*； CB-86
Iso-Olomoucine （50 mg）2-[[7-methyl-6-[（phenylmethyl）amino]-7H-purin-2-yl]amino]-ethanol； Iso-Olomoucine
Programmed Cell Death Protein 4 （C-term） Blocking Peptide （200 ug）PDCD4； Programmed Cell Death Protein 4 （C-term） Blocking Peptide
Pseudolaric Acid B （10 mg）4a-（acetyloxy）-3-[（1E，3E）-4-carboxy-1，3-pentadien-1-yl]-3R，4S，4aS，5，6，9-hexahydro-3-methyl-1-oxo-7-methyl ester； 1H-4，9aR-ethanocyclohepta[c]pyran-7-carboxylic acid； PAB； Pseudolaric Acid B
ACS 67 （1 mg）7-[（1R，2R，3R，5S）-3，5-dihydroxy-2-[（3R）-3-hydroxy-5-phenylpentyl]cyclopentyl]-4-（3-thioxo-3H-1，2-dithiol-5-yl）phenyl ester， 5Z-heptenoic acid； ACS 67
13，14-dihydro-19（R）-hydroxy Prostaglandin E1 （50 ug）9-oxo-11。alpha。，15S，19R-trihydroxy-prostan-1-oic acid； 19（R）-hydroxy PGE0|13，14-dihydro-19（R）-hydroxy PGE1； 13，14-dihydro-19（R）-hydroxy Prostaglandin E1