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更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
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SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
产品名称 | SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13说明书 |
用途 | 仅用科研 |
保存条件 | 4℃保存一年;-20℃长期保存 |
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞1964年建系,源自3个月胎龄的女性胚胎的肺成纤维细胞,经SV-40转化。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:2~1:10传代,每周换液2次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体 45~89
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。2,4- 二氯苯氧乙酸 5g
2,5- 二苯基恶唑 5g
2,6- 二氯酚靛酚钠 1g
2.0 mL RNase-free 离心管 500 支
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装 ) 1000 支
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装带芯 ) 1000 支
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 盒装 ) 96 支
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 盒装已灭菌 ) 1000 支
200μLRNase-free 黄吸头 ( 盒装已灭菌带芯 ) 96 支
3- 氨基 -9- 乙基咔唑 5g
3- 苯甲酰丙酸 5g
3- 三 ( 羟甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸 10g
3- 异丁基 -1- 甲基黄嘌呤 250g
3-( 环己胺 )-1- 丙磺酸 10g
3-(3,4- 二羟基苯 )-L- 丙氨酸 5g
3,3’- 二氨基联苯胺四盐酸 1g
3,3’,5,5’- 四甲基联苯胺二盐酸 1g
3,5 二硝基水杨酸 25g
3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物 25 OD
3'-RACE 试剂盒 10 次
4- 氨基 -N,N- 二甲基盐酸盐 5g
4- 甲基伞形酮 10g
4- 甲基伞形酮 -β-D- 葡糖苷酸 100mg
4- 氯 -1- 萘酚 5g
4% 多聚甲醛 250 mL
4% 多聚甲醛 (RNA ) 250 mL
4’,6- 二脒基 -2- 苯基吲哚二盐酸盐 10mgOU749 (1 mg)N-[5-[(4-methoxyphenyl)methyl]-1,3,4-thiadiazol-2-yl]-benzenesulfonamide; OU749
19(R)-hydroxy Prostaglandin E1 (500 ug)9-oxo-11。alpha。,15S,19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 19(R)-hydroxy PGE1; 19(R)-hydroxy Prostaglandin E1
Iberin (5 mg)1-isothiocyanato-3-(methylsulfinyl)-propane; NSC 321801; Iberin
Sulprostone (5 mg)N-(methylsulfonyl)-9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; Sulprostone
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α (10 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGF1α; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α
5-trans Prostaglandin F2β (1 mg)9β,11α,15S-trihydroxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid; 5,6-trans PGF2β|5-trans-9β-Prostaglandin F2α; 5-trans Prostaglandin F2β
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester (50 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto PGF2α isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester
15(S)-Fluprostenol isopropyl ester (1 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, isopropyl ester; 15(S)-Flu-Ipr; 15(S)-Fluprostenol isopropyl ester
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F2α (500 ug)9α,11α,15R,19R-tetrahydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGF2α; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F2α
Prostaglandin J2 (5 mg)11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,9,13E-trien-1-oic acid; PGJ2; Prostaglandin J2
Leukotriene B4 Ethanolamide (50 ug)N-(2-hydroxyethyl)-5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraenamide; LTB4-EA; Leukotriene B4 Ethanolamide
12(S)-hydroxy-16-Heptadecynoic Acid (10 mg)12S-hydroxy-16-heptadecynoic acid; 12(S)-hydroxy-16-Heptadecynoic Acid
9(S)-HODE-d4 (50 ug)9S-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic-9,10,12,13-d4 acid; 9(S)-HODE-d4
8(S),15(S)-DiHETE (50 ug)8S,15S-dihydroxy-5Z,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 8(S),15(S)-DiHETE
Arachidonic Acid methyl ester-d8 (1 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,6,8,9,11,12,14,15-d8 acid, methyl ester; Methyl Arachidonate-d8; Arachidonic Acid methyl ester-d8
8-Isoprostane Affinity Column (20 ml) (1 ea)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane Affinity Column (20 ml)