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更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
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人乳腺上皮细胞;MCF-10A说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
产品名称 | 人乳腺上皮细胞;MCF-10A说明书 |
用途 | 仅用科研 |
保存条件 | 4℃保存一年;-20℃长期保存 |
细胞名称
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 5%HS + 10ug/ml insulin + 20ng/ml EGF + 100ng/ml 霍乱毒素 + 0.5ug/ml 氢化可
传代方法
传代情况
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D12S391:17,20;D13S317:8,9;S16S539:11,12;D18S51:18,19;D19S433:13,15;D21S11:28,30;D2S1338:21,26;D3S1358:14,18;D5S818:10,13;D6S1043:12,18;D7S820:10,11;D8S1179:14,16;FGA:22,24;Penta E:13,14;TH01:8,9.3;TPOX:9,11;vWA:15,17;
同工酶
染色体
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。4× 核酸液相杂交液 10mL
4mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD) 1个
4mL DNA 离心超滤管 (300-500 KD) 1个
4mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD) 1个
4mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD) 1个
4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD) 1个
5'- 单磷酸腺苷二钠 5g
5- 氟 -5’- 脱氧尿苷 10mg
5- 磷酸吡哆醛,一水 1g
5- 溴 -2'- 脱氧尿苷 100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷 100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷 100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基磷酸盐 (BCIP) 100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP) 100mg
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷 5mg
5(6)-CFDA 100mg
5(6)-TRITC 10mg
5,5- 二硫代双 (2- 硝基苯甲酸 ) 1g
5′ - 二磷酸鸟苷二钠 10mg
5′ - 三磷酸鸟苷三钠 10mg
5-Carboxyfluorescein 100mg
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester 10mg
5-FITC 1g
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 ) 1mL
5'-RACE 试剂盒 10 次Ovalbumin Precoated 96-Well Strip Plate (1 ea)Ovalbumin Precoated 96-Well Strip Plate
17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum (500 dtn)Bimatoprost EIA Antiserum; 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum
15(S)-HpEDE (250 ug)15S-hydroperoxy-11Z,13E-eicosadienoic acid; 15(S)-HpEDE
sPLA2 (human Type IIA) Affinity Sorbent (1 mL)Secretory Phospholipase A2 (human synovial); sPLA2 (human Type IIA) Affinity Sorbent
Tris-HCl Stock Solution (1 M, pH 7。0) (1 L)Tris-HCl Stock Solution (1 M, pH 7。0)
TBS Stock Solution (10X, pH 7。4) (250 mL)Tris-buffered Saline; TBS Stock Solution (10X, pH 7。4)
Docosahexaenoyl PAF C-16 (1 mg)1-O-hexadecyl-2-O-(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Docosahexaenoyl PAF C-16
2-Arachidonyl Glycerol ether (5 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraen-2-glyceryl ether; 2-AG ether|Noladin; 2-Arachidonyl Glycerol ether
Oleyl Trifluoromethyl Ketone (50 mg)1,1,1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one; OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone; Oleyl Trifluoromethyl Ketone
DMSO Assay Reagent (3 ml)DMSO Assay Reagent
SIRT2 Direct Peptide (1 ea)SIRT2 Direct Peptide
Coenzyme A Standard (5 mg)Coenzyme A Standard
PK/PEP Cofactor Mixture (1 mg)PK/PEP Cofactor Mixture
GPx Co-Substrate Mixture (40 wells)GPx Co-Substrate Mixture
SOD Assay Sample Buffer (10X) (1 ea)Sample Buffer (10X); SOD Assay Sample Buffer (10X)
LY255283 (5 mg)1-[5-ethyl-2-hydroxy-4-[[6-methyl-6-(1H-tetrazol-5-yl)heptyl]oxy]phenyl]-ethanone; LY255283
PHOP (5 mg)1-oxazolo[4,5-b]pyridin-2-yl-6-phenyl-1-hexanone; CAY10402|Phenyl hexanoyl oxazolopyridine; PHOP
Potassium Hydroxide Assay Reagent (1 ea)Potassium Hydroxide; Potassium Hydroxide Assay Reagent
Nω-propyl-L-Arginine (100 mg)N5-[imino(propylamino)methyl]-L-ornithine; Nω-propyl-L-Arginine
Staurosporine (1 mg)2,3,10,11,12,13-hexahydro-10R-methoxy-9S-methyl-11R-methylamino-9S,13R-epoxy-1H,9H-diindolo[1,2,3-gh; 3’,2’,1’-lm]pyrrolo[3,4-j][1,7]benzodiazonin-1-one; Stsp; Staurosporine
Dihydrorhodamine 123 (5 mg)2-(3,6-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid, methyl ester; DHR; Dihydrorhodamine 123