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更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
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人脐静脉内皮细胞;HUV-EC价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞可用于血管内皮修复损伤的研究。
培养条件 Medium 200 + LSGS
传代方法
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
AP 标记的抗地高抗体 10μL
AP 标记的抗生物素抗体 10μL
ApaI 2000U
APMSF 溶液,10mg/mL 1mL
apo- 转铁蛋白 10mg
apo- 转铁蛋白 10mg
ATP 发光法细胞活力检测试剂盒 200 次
ATP 检测试剂盒 200 次
ATP 硫酸化酶 10U
ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜不需高速离心 ) 50 T
ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜需高速离心 ) 50 T
ATP 溶液,100mM 0.25mL
ATP 溶液,1mM 1mL
ATP 溶液,2.5mM 2mL
ATP 依赖的 DNase 200U
吖啶橙 5g
阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂 100 次
阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂 500 次
阿拉伯树胶粉 100g
阿利新蓝 8GX 1g
埃文斯蓝 1g
矮壮素 100g
氨苄青霉素干粉 1gJWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5 (500 ug)(1-(5-hydroxyhexyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)(naphthalen-1-yl)methanone; JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite-d5
Cysmethynil (5 mg)5-(3-methylphenyl)-1-octyl-1H-indole-3-acetamide; Icmt Inhibitor; Cysmethynil
JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite (1 mg)[1-(5-hydroxyhexyl)-1H-indol-3-yl]-1-naphthalenyl-methanone; JWH 019 N-(5-hydroxyhexyl) metabolite
Vatalanib (hydrochloride) (100 mg)N-(4-chlorophenyl)-4-(4-pyridinylmethyl)-1-phthalazinamine, dihydrochloride; CGP 79787|PTK/ZK; Vatalanib (hydrochloride)
NSC 87877 (100 mg)8-hydroxy-7-[2-(6-sulfo-2-naphthalenyl)diazenyl]-5-quinolinesulfonic acid; NSC 87877
Polygodial (1 mg)(1R,4aS,8aS)-1,4,4a,5,6,7,8,8a-octahydro-5,5,8a-trimethyl-1,2-naphthalenedicarboxaldehyde; Tadeonal; Polygodial
PF-05274857 (hydrochloride) (10 mg)1-(4-(5’-chloro-3,5-dimethyl-[2,4’-bipyridin]-2’-yl)-piperazin)-3-(methylsulfonyl)-1-propanone, monohydrochloride; PF-05274857 (hydrochloride)
AB-PINACA-d9 (1 mg)(S)-N-(1-amino-3-methyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(pentyl-2,2’,3,3’,4,4’,5,5,5-d9)-1H-indazole-3-carboxamide; AB-PINACA-d9
1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC (500 mg)1,2-diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine; 1,2-DAPC|L-α-Diarachidonoyl lecithin|1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphocholine; 1,2-Diarachidoyl-sn-glycero-3-PC
(R)-(-)-MT-45 (hydrochloride) (1 mg)1-cyclohexyl-4-[(1R)-1,2-diphenylethyl]-piperazine, dihydrochloride; (R)-(-)-MT-45 (hydrochloride)
ML-191 (5 mg)5-phenyl-3-(1-(1-(p-tolyl)cyclopropane-1-carbonyl)piperidin-4-yl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one; CCG-152883|CID-23612552; ML-191
Epalrestat (5 mg)5Z-[(2E)-2-methyl-3-phenyl-2-propen-1-ylidene]-4-oxo-2-thioxo-3-thiazolidineacetic acid; Kinedak|ONO-2235|Sorbistat; Epalrestat
Latanoprost (free acid)-d4 (1 mg)9α,11α,15R-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prost-5Z-en-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 17-phenyl-13,14-dihydro trinor Prostaglandin F2α-d4|PhXA 85-d4|Lat-FA-d4; Latanoprost (free acid)-d4