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人胚肺成纤维细胞；HFL1图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人胚肺成纤维细胞；HFL1图片
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞为稳定二倍体细胞。 
培养条件  F12K  10%FBS
传代方法  1:4-1:6，每周换液2-3次
传代情况 P16
冻存条件  90%FBS+10%DMSO
支原体检测 
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:8；D16S539:9,11；D18S51:15；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:21,24；PentaD:9,14；PentaE:21；TH01:6,9；TPOX:8；vWA:16
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

百万碱基细菌 (G-)DNAout    10 次
百万碱基细菌 (G+)DNAout    10 次
百万碱基血液 DNAout    10 次
百万碱基真菌 DNAout    10 次
百万碱基植物 DNAout     10 次
半干法电转液 ( 干粉 )    20L
半乳糖氧化酶    150U
半纤维素酶    15ku
包涵体大量纯化试剂盒    2次
包涵体蛋白溶解及复性套装    100 次
包涵体微量纯化试剂盒    20 次
包涵体中量纯化试剂盒    5次
胞嘧啶    5g
苯酚红    5g
苯基介质    50mL
苯甲基磺    1g
崩溃酶    500mg
鼻腔采样拭子     50 支
吡啰红 G    5g
苄眯盐酸盐    5gAB-CHMINACA metabolite M5A （1 mg）1-（（4-hydroxycyclohexyl）methyl）-1H-indazole-3-carboxylic acid
CBL-018 （10 mg）naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate
X-Gal5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside； 5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl-β-D-galactopyranoside
BVT 948 （5 mg）4-hydroxy-3,3-dimethyl-2H-benz[g]indole-2,5（3H）-dione
LY2811376（4S）-4-[2,4-difluoro-5-（5-pyrimidinyl）phenyl]-5,6-dihydro-4-methyl-4H-1,3-thiazin-2-amine
Tesaglitazar （5 mg）AZ 242|GalidaTM； （αS）-ethoxy-4-[2-[4-[（methylsulfonyl）oxy]phenyl]ethoxy]-benzenepropanoic acid
Clinafloxacin （hydrochloride） （500 mg）AM1091； 7-（3-ami-pyrrolidinyl）-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
Rosiglitazone （25 mg）BRL 49653； 5-[[4-[2-（methyl-2-pyridinylamino）ethoxy]phenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
Deltarasin （hydrochloride） （5 mg）2-[4-[（2S）-2-（2-phenyl-1H-benzimidazol-1-yl）-2-（4-piperidinyl）ethoxy]phenyl]-1-（phenylmethyl）-1H-benzimidazole, hydrochloride
Difenoxin （hydrochloride） （500 ug）Diphenoxylic Acid|R 15403； 1-（3-cyano-3,3-diphenylpropyl）-4-phenyl-4-piperidinecarboxylic acid, monohydrochloride
EC 23 （25 mg）AGN 190205|BASF 46928； 4-[2-（5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl）ethynyl]-benzoic acid
BLT1 Receptor Blocking Peptide （200 ug）BLTR1|LTB4 Receptor 1|Leukotriene B4 Receptor 1
AZD 24614-[[4-fluoro-3-[（4-methoxy-1-piperidinyl）carbonyl]phenyl]methyl]-1（2H）-Phthalazinone
单甲基化组蛋白H3K9多肽Monomethyl Histone H3K9 Peptide （100 ul）
Actinomycin C1， ActinomycinActinomycin D （10 mM）
变色硅胶    50g
冰袋    1个
丙二醛测试盒 / 脂质过氧化物测试盒    50 T
丙酮酸激酶    2mg