添加QQ号
3004901493
产品型号:
更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
访问量:349
021-39596320
相关文章
人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1图片
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 肿瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的18(HPV-18)进行转化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 细胞株 [PubMed: 9214605]. 在三维Matrigel培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE
培养条件 这株细胞的基本培养基作为Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化细胞无血清培养基K-SFM,kit目录号17005-042。随kit提供这株细胞生长所需的两种添加剂(牛垂体提取物BPE及人重组表皮生长因子EGF)。 配制*生长培养基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE – 随K-SFM提供 5 ng/ml EGF -随K-SFM提供。
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(52+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
丁酸钠 1g
丁酰胆碱酯酶 500U
定影粉 1袋
动态显色法内毒素定量试剂盒 48 次
动态浊度法内毒素定量试剂盒 1.7mL×10 支
动物 DNAout 100mL
动物 DNAout 250mL
动物 RNAout(TRIzol) 100mL
动物 RNAout(TRIzol) 250mL
动物上皮细胞生长因子 5mL
动物细胞核蛋白微量制备试剂盒 100 次
动物细胞核蛋白微量制备试剂盒 25 次
动物细胞裂解液 A 50mL
动物细胞裂解液 B 50mL
动物粒体纯化试剂盒 ( 粗提 ) 15 次
动物粒体纯化试剂盒 ( 精提 ) 15 次
动物粒体总蛋白提取剂盒 50 次
动物种属鉴定 PCR Mix 1 100 次
动物种属鉴定 PCR Mix 2 100 次
动物种属鉴定 PCR Mix 3 100 次
动物种属鉴定 PCR Mix 4 100 次1a,1b-dihomo Prostaglandin E1 (1 mg)9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-1a,1b-dihomo-prost-13E-en-1-oic acid; 1a,1b-dihomo PGE1; 1a,1b-dihomo Prostaglandin E1
N-pentadecanoyl-L-Homoserine lactone (5 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-pentadec*; C15-HSL; N-pentadecanoyl-L-Homoserine lactone
(E)-C-HDMAPP (ammonium salt) (5 mg)P’-[(3E)-5-hydroxy-4-methyl-3-penten-1-yl]-isohypophosphoric acid, triammonium salt; (E)-1-Hydroxy-2-Methylbut-2-enyl 4-Diphosphate (ammonium salt); (E)-C-HDMAPP (ammonium salt)
PP2 (10 mg)3-(4-chlorophenyl)-1-(1,1-dimethylethyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine; AGL 1879; PP2
Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate (5 mg)2S-ammonio-3R-hydroxy-5-((2-oxo-2H-chromen-7-yl)oxy)pentyl hydrogen phosphate; S1P Lyase Fluorogenic Substrate; Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate
CB-86 (10 mg)N-cyclopropyl-8-[3-(1,1-dimethylheptyl)-5-hydroxyphenoxy]-oct*; CB-86
Iso-Olomoucine (25 mg)2-[[7-methyl-6-[(phenylmethyl)amino]-7H-purin-2-yl]amino]-ethanol; Iso-Olomoucine
tetranor-PGJM (25 ug)8-((1R,2S)-2-(2-carboxyethyl)-5-oxocyclopent-3-en-1-yl)-6-oxooctanoic acid; tetranor-PGJ Metabolite; tetranor-PGJM
(+)-Warfarin (5 mg)4-hydroxy-3-[(1R)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (R)-Warfarin; (+)-Warfarin
(S)-Lisofylline (25 mg)3,7-dihydro-1-[5S-hydroxyhexyl]-3,7-dimethyl-1H-purine-2,6-dione; (+)-Lisofylline|(S)-LSF; (S)-Lisofylline
IWR-1-endo (5 mg)4-[(3aR,4S,7R,7aS)-1,3,3a,4,7,7a-hexahydro-1,3-dioxo-4,7-methano-2H-isoindol-2-yl]-N-8-quinolinyl-benzamide; IWR-1-endo
动物种属鉴定 PCR Mix 5 100 次
动物种属鉴定 PCR Mix 6 100 次