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更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
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人脐静脉细胞融合细胞;EA.hy926说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
产品名称 | 人脐静脉细胞融合细胞;EA.hy926说明书 |
用途 | 仅用科研 |
保存条件 | 4℃保存一年;-20℃长期保存 |
细胞名称
形态特性 内皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 在PEG胁迫下,将原代培养的人脐静脉细胞与抗硫鸟嘌呤的A549克隆株融合,构建了人脐静脉细胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培养基上生长并以八因子相关抗原筛选。 EA.hy926已经过100次以上的群体倍增(PDLs)。 电镜照片显示Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器,分化的内皮细胞特性如血管生成,体内平衡/血栓形成,血压及炎症反应。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463]
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。动植物膜蛋白微量制备试剂盒 50 次
动植物总蛋白微量提取试剂盒 50 次
杜氏 PBS 缓冲液 ,10× 100mL
端粒酶重复片段扩增试剂盒 (TRAP) 50 次
对氨基苯磺酸 25g
对苯醌固定液 250 mL
对硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 1g
对硝基苯磷酸二钠盐 1g
多点突变试剂盒 20 次
多酚氧化酶 ( 菌菇 ) 25KU
多核苷酸磷酸化酶 100mg
多聚 -L- 赖氨酸 (15-30 万 ) 25mg
多聚 -L- 赖氨酸 (3-7 万 ) 25mg
多聚 -L- 赖氨酸 (7-15 万 ) 25mg
多聚半乳糖醛酸钠盐 1g16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 (100 mg)6,9-dioxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid; 16,16-dimethyl-6-keto PGE1; 16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1
19(R)-hydroxy Prostaglandin E1 (50 ug)9-oxo-11。alpha。,15S,19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 19(R)-hydroxy PGE1; 19(R)-hydroxy Prostaglandin E1
Iberin (1 mg)1-isothiocyanato-3-(methylsulfinyl)-propane; NSC 321801; Iberin
Sulprostone (1 mg)N-(methylsulfonyl)-9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; Sulprostone
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α (500 ug)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prostan-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGF1α; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α
iPF2α-IV (50 ug)5(S),9。alpha。,11。alpha。-trihydroxy-1。alpha。,1。beta。,1。gamma。-trihomo-18,19,20-trinor-8。beta。-prosta-2Z,6E-dien-1-oic acid; iPF2α-IV
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester (10 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto PGF2α isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester
15(S)-Fluprostenol (100 mg)9α,11α,15S-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(S)-Fluprostenol
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F2α (50 ug)9α,11α,15R,19R-tetrahydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGF2α; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin F2α
Prostaglandin J2 (1 mg)11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,9,13E-trien-1-oic acid; PGJ2; Prostaglandin J2
Leukotriene B4 (25 ug)5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; LTB4; Leukotriene B4
6-keto Prostaglandin F1α-d4 (1 mg)6-oxo-9α,11α,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 6-keto PGF1α-d4; 6-keto Prostaglandin F1α-d4
多聚甲醛 25g
多聚甲醛 - 磷酸缓冲固定液 250 mL
多聚甲醛 - 氢氧固定液 250 mL
多粘菌素 B 硫酸盐 5mL