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人外周淋巴细胞；U266B1图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人外周淋巴细胞；U266B1图片
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞系是由N.K. Nilsson于1970年从一名53岁患有骨髓瘤男性的外周血中分离建立的。免疫学研究表明，该细胞和体内骨髓瘤细胞表达相同的免疫球蛋白。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C8
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 同工酶鉴定
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

JM83 菌种    1mL
肌    100g
肌苷    5g
肌球蛋白    100mg
肌酸激酶测试剂盒    24 T
姬姆色素染料    1g
基因列表    --
基因转染增强剂    0.5 mL
激动素    250mg
*热稳定单链结合蛋白    50μg 
即用型 EMSA 试剂盒    100 次
即用型 GFP 标签蛋白裂解液    100μL
即用型 PCR 检测试剂盒系列    50T
即用型 PCR 试剂盒 2.0     1 mL
即用型 PCR 试剂盒 2.0     9 mL
即用型 PCR 试剂盒 3.0    1 mL
即用型 PCR 试剂盒 3.0    9 mL
即用型多重 PCR 试剂盒    50 次4α，9-Epoxy-3β-veratroyloxy-5β-cevan-4β，Veratridine
N-（7-cyano-6-（4-fluoro-3-（2-（3-（trifluoromethyl）phenyl）acetamido）phenoxy）benzo[d]thiazol-2-yl）cyclopropanecarboxamideTAK-632
N-KN-93
Aminooxoacetic acid sodium salt， Oxalic acid monoamide sodium salt， Oxamic acid sodium saltSodium Oxamate
6-CD437
2-[Methyl（tetrahydro-1，1-dioxido-3-thienyl）amino]-2-oxoethyl （E）-3-（3-nitrophenyl）prop-2-enoateCID-5951923
2，8-dibenzyl-6-（4-hydroxyphenyl）imidazo[1，2-a]pyrazin-3（7H）-one； 2-DeoxycoelenterazineCoelenterazine-h
Rabbit IgG， 100 ugRabbit IgG
Glutathione SepharoseGlutathione Sepharose
Bovine Serum Albumin – Heat Shock， Fatty Acid Free， pH 7.0Bovine Serum Albumin – Heat Shock， Fatty Acid Free， pH 7.0
Lipase Substrate （1。2 ml）Lipase Substrate
clasto-Lactacystin beta-lactoneclasto-Lactacystin beta-lactone
Bacterial Protein Extraction Reagent, EZLysEZLys Bacterial Protein Extraction Reagent
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDaDiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa
12-S)-HETE Lipid Maps MS Standard (250 ug)12-S)-HETE Lipid Maps MS Standard, 12S-hydroxy-5Z,8Z,1E,14Z-eicosatetraenoic acid
-+)-Goniothalesdiol (25 mg)-+)-Goniothalesdiol, 4,7-anhydro-2,3-dideoxy-7R-C-phenyl-D-xylo-heptonic acid, methyl ester
8-iso Prostaglandin A2 (10 mg)8-epi PGA2, 8-iso Prostaglandin A2, 9-oxo-15S-hydroxy-(8.beta.)-prosta-5Z,1,13E-trien-1-oic acid
EAM2201 (5 mg)JWH 21 N-(5-fluoropentyl) analog, EAM2201, (4-ethyl-1-naphthalenyl)[1-(5-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl]-methanone
即用型封堵液 (NC )     50mL
即用型封堵液 (Nylon )    50mL
即用型高保真 PCR 试剂盒    1.5mL
即用型高保真 PCR 试剂盒    9mL
即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6，有 MCS)    20 次