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人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN价格
产品简介:

人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN价格售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

产品型号:

更新时间:2017-01-05

厂商性质:经销商

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产品介绍

人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。

人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN价格操作步骤:

1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C6
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

L- 异亮氨酸    25g
L- 转铁蛋白    10mg
L- 组氨酸    25g
L- 组氨酸盐酸盐    25g
L-(+) 乳酸锂盐    5g
L(+) 鼠李糖    5g
L-15 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )    500mL
Lambda 核酸外切酶    1000U
lambda(λ)DNA    5μg
lambda(λ)DNA    5μg
lambda(λ)DNA    5μg
LAMP 可见光染料    1mL
LAMP 扩增阳性对照    50 次
L-Arginine(NO 前体 )    5gADB-PINACA pentanoic acid metabolite (1 mg)5-(3-((1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)carbamoyl)-1H-indazol-1-yl)pentanoic acid; ADB-PINACA pentanoic acid metabolite
1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE (500 mg)1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylethanolamine; 1,2-DSPE|1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphoethanolamine; 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE
Ilimaquinone (100 ug)3-[[(1R,2S,4aS,8aS)-decahydro-1,2,4a-trimethyl-5-methylene-1-naphthalenyl]methyl]-2-hydroxy-5-methoxy-2,5-cyclohexadiene-1,4-dione; Ilimaquinone
ML-191 (1 mg)5-phenyl-3-(1-(1-(p-tolyl)cyclopropane-1-carbonyl)piperidin-4-yl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one; CCG-152883|CID-23612552; ML-191
Ketoconazole (500 mg)1-[4-[4-[[(2R,4S)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1H-imidazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]-1-piperazinyl]-ethanone; Nizoral|R 4140Ketoconazole
Fluprostenol-d4 (100 ug)9α,11α,15R-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 16-m-trifluoromethylphenoxy tetranor Prostaglandin F2α-d4; Fluprostenol-d4
Fluprostenol Lactone Diol (50 mg)(+)-(3aR,4R,5R,6aS)-hexahydro-5-hydroxy-4-[(1E,3R)-3-hydroxy-4-(3-trifluoromethyl)phenoxy-1-butenyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one; Fluprostenol Lactone Diol
CP 47,497-C9-homolog (1 mg)cis-5-(1,1-dimethylnonyl)-2-(3-hydroxycyclohexyl)-phenol; CP 47,497-C9-homolog
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 (5 mg)N-(2-hydroxyethyl-1,1’,2,2’-d4)-octadeca-9Z,12Z,15Z-trienamide; α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
LB 平板培养基 (Amp 抗性 )    10 块
LB 平板培养基 (Kan 抗性 )    10 块
LB 平板培养基 (Tet 抗性 )    10 块
LB 平板培养基 无抗    10 块
LBA4404 农杆菌感受态细胞    10×100μL

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