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更新时间:2017-01-11
厂商性质:经销商
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BALB/C小鼠肝上皮细胞;BNL 1ME A.7R.1图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 BALB/C小鼠肝上皮细胞;BNL 1ME A.7R.1图片
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞由正常肝上皮细胞BNL CL.2经甲基胆蒽诱导转化而建立,在0.3%的琼脂中可生长,鼠痘病毒阴性。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3~1:8传代,每周2~3次换液。
传代情况 P14
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
mRNA 提取试剂盒25 次
蓝胶琼脂糖50mL
130647-200尿嘧啶糖基化酶抑制剂200U
120630-25Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL
TB1 菌种1mL
碘硝基四唑紫嘌呤250mg
青链溶液100mL
萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒100 次
131086-2辣根过氧化物酶标记亲和素2mg
140590-15核苷酸类似物法易错 PCR 试剂盒15 次
脱落酸25mg
反玉米素50mg兔子蛋白激酶B(PKB)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
兔热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人真胰岛素(TI)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胰岛细胞抗体(ICA)Elisa试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人腺毒IgM(ADV-IgM)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人微量转铁蛋白(MTF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人伤寒抗原(St-Ag)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人前列腺干细胞抗原(PSCA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人内毒素(ET)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人磷酸肌酸激酶(CPK)Elisa试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人颗粒溶素(granulysin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人环磷酸腺苷(cAMP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人睾酮(T)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
琥珀酸 ( 丁二酸 )25g
Protein G 磁珠1mL
CAS9037-22-3支链淀粉1g
60603-20即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次
显影粉1袋