添加QQ号
3004901493
产品型号:
更新时间:2017-01-11
厂商性质:经销商
访问量:305
021-39596320
小鼠肝癌瘤株;H22图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠肝癌瘤株;H22图片
形态特性 实体瘤、腹水瘤
生长特性 体内生长
特征特性 1952年,前苏联医学科学院肿瘤研究所以C3HA小鼠诱发的H22肝癌实体瘤的瘤细胞悬液,昆明种小鼠皮下移植后,转腹水瘤。经检测,该瘤株在Km小鼠、615小鼠、C57BL/6小鼠、BALB/C小鼠体内可以形成实体瘤和腹水瘤。
培养条件 -
传代方法 制备成细胞悬液接种至615等小鼠。
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体 -
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
lambda(λ)DNA5μg
丁酰胆碱酯酶500U
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC·7-AAD) 20 次
CAS98185-20-7S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石25mg
100830-30低 pH 缓冲液套装30 次
组蛋白 3.1 小鼠单抗1000μL
氯化胆碱100g
多聚半乳糖醛1g
过氧化氢定量分析试剂盒 ( 水兼容性 )250 T
CAS9025-82-5磷酸二酯酶Ⅰ100U
140646-100鲁米诺血迹鉴定试剂盒100mL
60305-250真菌 RNAout250 次
NotI150U
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg
一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)30 次
22-0070-0.2Actin-Tracker Green( 微丝绿色荧光探针 )0.2mL
17-012-9610 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌带芯 )96 支
胚胎裂解液1mL
Bst DNA 聚合酶,全长500U
PMA/TPA (PKC 激活剂 )1mg
血液保存和 DNA 纯化套装100 次
23-0650-1SB203580(p38MAPK 抑制剂 )1mg
80803-50柱式动物线粒体 DNAout,PCR 50 次人组织相容性复合体Ⅰ类相关基因D(MICD)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胰多肽(PP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人血管抑素/血管稳定蛋白(angiostatin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2) ELISA试剂盒48T/96T试剂盒组装/原装
人维生素B6(VB6)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人前列腺素E2(PGE2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人内皮素(ET)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗促甲状腺素受体抗体(TRAb) ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人碱性磷酸酶(ALP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人黄曲酶毒素(AFT)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人庚型肝炎毒IgM(HGV-IgM)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人补体因子H(CFH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装