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小鼠SRSV转化的3T3细胞;SRSV/3T3图片
产品简介:

小鼠SRSV转化的3T3细胞;SRSV/3T3图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

产品型号:

更新时间:2017-01-13

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产品介绍

小鼠SRSV转化的3T3细胞;SRSV/3T3图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称 小鼠SRSV转化的3T3细胞;SRSV/3T3图片
形态特性  圆形
生长特性 贴壁生长
特征特性  这株细胞是NIH/3T3细胞用SRS小鼠腹水瘤无细胞提取物感染并在体外传代。 在感染过的NIH/3T3细胞的细胞质中发现了A型和C型病毒颗粒。 发现细胞中有逆转录酶和自由的白血病病毒前病毒-DNA。 用这个培养细胞对BALB/c裸鼠进行皮下接种,100%诱导生成纤维肉瘤。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

cis,cis-Octadeca-9,12-dienol (500 mg)Linoleic alcohol|Linoleyl alcohol; 9Z,
SR 3677 (10 mg)N-[2-[2-(dimethylamino)ethoxy]-4-(1H-pyrazol-4-yl)phenyl]-2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-2-carboxamide
OxolinicNSC 110364|Urinox; 5-ethyl-5,8-dihydro-8-oxo-1,3-dioxolo[4,5-g]quinoline-7-carboxylic acid
Clinafloxacin (hydrochloride) (100 mg)AM1091; 7-(3-ami-pyrrolidinyl)-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
AM80 (10 mg)Amnolake|NSC 608000|Retinobenzoic Acid|Tamibarotene; 4-
AB-FUBINACA isomer 5 (5 mg)N-(1-ami-oxobutan-2-yl)-1-(4-fluorobenzyl)-N-methyl-1H-indazole-3-carboxamide
(R)-nitro-Blebbistatin (5 mg)R-(
2,3-Ethylone isomer (hydrochloride) (5 mg)2,3-bk-MDEA isomer; 1-(benzo[d][1,3]dioxol-4-yl)-2-(ethylamino)propan-1-one, monohydrochloride
Fluorescent Substrate for Thioredoxin V2 Assay (1 ea)Fluorescent Substrate for Thioredoxin V2 Assay
*基化组蛋白H4K20多肽Trimethyl Histone H4K20 Peptide (200 ul)
二甲基化组蛋白H3K36多肽Dimethyl Histone H3K36 Peptide (100 ul)
Z-VDVAD-FMK, Caspase-2抑制剂(氟甲基酮)Caspase-2 Inhibitor Z-VDVAD-FMK
OAOkadaic acid
Sunitinib Maleate, SU-11248, Sutent, PHA-290940AD, PNU-290940ADSunitinib Malate (Sutent)
1L-6-Hydroxymethyl-chiro-inositol2-[(R)-2-O-methyl-3-O-octadecylcarbonate]Akt Inhibitor
5-(6-Quinoxalinylmethylene)-2,4-thiazolidine-2,4-dionePI3-K
[VO(Hhpic-O,O) (Hhpic-O,N)(HVO-OHpic, Trihydrate
3’-[α-Amino-p-methoxyhydrocinnamamido]-3’-deoxy-N,N-dimethyladenosine dihydrochloridePuromycin Dihydrochloride
2-Amino-9--6,9-dihydro-3H-purin-6-oneGanciclovir
Methyl -5-((2-t-butylcarbamothioyl)hydrazono)methyl)-1-(2,4-difluorophenyl)-1H-pyrazole-4-carboxylateCID 2745687
6-Benzylamino-2[(R)-(1’-ethyl-2’-hydroxyethylamino)]-9-isopropylpurine; CYC202; SeliciclibRoscovitine
CGP-79787; PTK 787; ZK222584Vatalanib Dihydrochloride
AdoMet SAM disulfate p-toluenesulfonate; SAMeS-Adenosyl-L-methionine disulfate tosylate
2,PRIMA-1
1H-Zebularine植物凝胶100g
10nt 随机引物,0.5μg/μL5μg
CAS71010-52-1植物凝胶100g
80814-200Bradford 法蛋白定量试剂盒200mL
柱式白色念珠菌 RNAout50 次
辣根过氧化物酶,偶联100mg
核糖核酸酶 A,牛胰25mg
TB1 感受态细胞10×100μL
CAS9010-34-8牛甲状素蛋白10mg
131236-250牛血清白蛋白封堵液250mL
β -琼脂糖酶25U
MboI500U
矮壮素100g
微量丙二醛测试盒 / 脂质过氧化物测试盒50 T
TAE 电泳液 ,50×2500mL
131280-250Zetterqvist 固定液250 mL
130972-50凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次
尿嘧啶切刻酶50U
96 孔板血液 DNAout( 离心法 )1次
Fluo-3AM( 钙离子荧光探针 )250μL
超纯水100mL
22-0330-1Fura-2 AM( 钙离子荧光探针 )1mg
80802B-100非冻型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 ) 100mL

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