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更新时间:2017-01-23
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大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)图片
形态特性 成肌细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 B. Kimes and B. Brandt从源于BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆了H9c2(2-1)细胞株。它表现许多骨骼肌的特性。 这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。 如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合发生得很快。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(13+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
牛γ干扰试剂盒规格型号:96T/48T牛γ干扰试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:牛γ干扰试剂盒、牛γ干扰elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人S100B试剂盒规格型号:96T/48T人S100试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人S100试剂盒、人S100elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人嗜性白血球相关之RNA水解酵家族成员12试剂盒规格型号:96T/48T人嗜性白血球相关之RNA水解酵家族成员12试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人嗜性白血球相关之RNA水解酵家族成员12试剂盒、人嗜性白血球相关之RNA水解酵家族成员12elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
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牛白细胞介2试剂盒规格型号:96T/48T牛白细胞介2试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:牛白细胞介2试剂盒、牛白细胞介2elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。β -琼脂糖酶 CAS37288-57-6 25U
PCNA 小鼠单抗 140592-100 100 μL
非冻型细菌 RNA 保存液 80601-100 100mL
30 次 免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 试剂盒
250g 3- 异丁基 -1- 甲基黄嘌呤
5mL 间充质干细胞软骨细胞分化生长因子
5mL PMSF 溶液,10mg/mL
间充质干细胞脂防细胞分化生长因子 21-0150-5 5mL
RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0 60308-100 100mL
1000 μL PCNA 小鼠单抗
50 次 DOP-PCR 试剂盒
50 次 DNA 电泳分子量标准 (3)λDNA/BstE II
100mL YPDG 液体培养基
异硫氰酸荧光素 CAS3326-32-7 50mg
亲和层析柱 140651-1 12 mL
50 次 真菌 RNAout
5g 邻苯二胺
5g 2,5- 二苯基恶唑
0.5g Catechin hydrate( 抗氧化剂 )
20 次 Southern Marker DL2000(DIG)
DNA 嵌套缺失试剂盒 100213-10 10 次
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)图片硫酸葡聚糖 120643-1 1g人脱氢表雄酮硫酯试剂盒规格型号:96T/48T人脱氢表雄酮硫酯试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人脱氢表雄酮硫酯试剂盒、人脱氢表雄酮硫酯elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人纤溶酶原激活剂试剂盒规格型号:96T/48T人纤溶酶原激活剂试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人纤溶酶原激活剂试剂盒、人纤溶酶原激活剂elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。