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更新时间:2017-01-23
厂商性质:经销商
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大鼠正常食管上皮细胞;RNEEC/HL-012图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 大鼠正常食管上皮细胞;RNEEC/HL-012图片
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人酶原Ⅱ试剂盒规格型号:96T/48T人酶原Ⅱ试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人酶原Ⅱ试剂盒、人酶原Ⅱ elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人血清白试剂盒规格型号:96T/48T人血清白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人血清白试剂盒、人血清白elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人血管紧张Ⅱ受体2抗体试剂盒规格型号:96T/48T人血管紧张Ⅱ受体2抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人血管紧张Ⅱ受体2抗体试剂盒、人血管紧张Ⅱ受体2抗体elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人腺苷三磷结合盒转运体A1试剂盒规格型号:96T/48T人腺苷三磷结合盒转运体A1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人腺苷三磷结合盒转运体A1试剂盒、人腺苷三磷结合盒转运体A1 elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人凝聚试剂盒规格型号:96T/48T人凝聚试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人凝聚试剂盒、人凝聚试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激试剂盒规格型号:96T/48T人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激试剂盒、人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人硫类肝试剂盒规格型号:96T/48T人硫类肝试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人硫类肝试剂盒、人硫类肝elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。
人粒细胞特异性抗核抗体试剂盒规格型号:96T/48T人粒细胞特异性抗核抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人粒细胞特异性抗核抗体试剂盒、人粒细胞特异性抗核抗体elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。100 次 双荧光素酶报告基因检测试剂盒
链霉亲和素,AP 标记 131022-0.5 0.5mL
即用型易错 PCR 试剂盒 101005-100 100 次
300μL 兔抗鸡 IgY,辣根过氧化物酶标记
50U Furin 蛋白酶
100mg 遗传
10 块 LB 平板培养基 (Tet 抗性 )
β- 淀粉酶 CAS9000-91-3 100g
克必隆 G 载体 4610-2 2μg
1g 纤维素酶
100 次 谷胱甘肽还原酶检测试剂盒
25mg 尿苷 -5'- 二磷酸
100 次 免 DNA 提取 PCR 试剂盒
硫酸葡聚糖 CAS9011-18-1 10g
Rosetta 菌种 12-248 1mL
250 次 液体样品 RNAout
1mL JM103 菌种
1mg 钙离子载体
250mL 氯萘酚溶液,3mg/mL
组蛋白 CAS9064-47-5 25g
青 G 盐溶液 120698-10 10mL
人可溶性瘤坏死α受体试剂盒规格型号:96T/48T人可溶性瘤坏死α受体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人可溶性瘤坏死α受体试剂盒、人可溶性瘤坏死α受体elisa试剂盒保存条件:2-8℃保质期:6个月。